產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:放線菌屬通用PCR檢測試劑盒價(jià)格 英文名稱:Actinomyces spp.PCR 編號(hào):HE30582-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;100g 微管多特異性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,細(xì)胞培養(yǎng)級 包裝;25g 微管蛋白,γ復(fù)合體關(guān)聯(lián)蛋白3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 網(wǎng)膜素試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;1g 晚期氧化蛋白產(chǎn)物試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 晚期糖基化終末產(chǎn)物受體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%;FLT3拮抗劑 包裝;500g 晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;10MG 外顯肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:potency>900ug/mg,BR 包裝;1g 唾液酸酶elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;250mg 唾液酸試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 唾液過氧化物酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,富馬酸鹽,BR 包裝;25g 拓樸異構(gòu)酶Ⅱ試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 脫氧皮質(zhì)酮試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BP2007,EP5. 包裝;100g 脫氧尿三磷酸試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 包裝;25g 脫氧核糖核酸酶Ⅰ試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP6 包裝;100ml 脫氫表雄酮硫酸酯試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;500ml 放線菌屬通用PCR檢測試劑盒價(jià)格Agarivorans albus 中文名稱:白色食藻菌種屬:Agarivorans albus分離基物:海藻提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:該菌株分泌產(chǎn)生瓊膠酶,瓊膠酶可降解瓊脂為瓊膠寡糖,瓊膠寡糖具有較高的生物活性如抗氧化,抗炎,抗癌以及益生元等作用。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:細(xì)菌用海洋液體培養(yǎng)基:[Bacto marine broth (DIFCO 2216)]:酵母膏 1.0g,蛋白胨 5.0g,F(xiàn)e(III) citrate 0.1g,NaCl 19.45g,MgCl2 5.9g,KCl 0.55g,Na2SO4 3.24g,CaCl2 1.80g,Na2CO3 0.16g,KBr 0.08g,SrCl2 34.0mg,H3BO3 22.0mg,NaSiO3 4.0mg,NaF 2.4g,NH4NO3 1.6mg,Na2HPO4 8mg,蒸餾水 1.0L,pH7.6。121℃,15min。生長條件:28℃,好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Edwardsiella tarda 中文名稱:遲緩愛德華氏菌(暫無)種屬:Edwardsiella tarda形態(tài)遲鈍愛德華菌(Edwardsiella tarda)屬于腸桿菌科的愛德華菌屬(Edwardsiella),有鞭毛、能運(yùn)動(dòng)、無莢膜,革蘭染色陰性兼性厭氧桿菌,其特征為靛基質(zhì)陽性,可以此與沙門菌屬、枸櫞酸桿菌和亞利桑那菌進(jìn)行鑒別。分離基物:人類糞便提供形式:凍干管,斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:。用于研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:37℃,好氧 純度:98% Ralstonia pickettii 中文名稱:皮氏羅爾斯通氏菌種屬:Ralstonia pickettii分離基物:氣管切開病人提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% streptococcus equinus 中文名稱:馬氏鏈球菌種屬:streptococcus equinus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:哥倫比亞血平板,BHI MRS培養(yǎng)基::酪蛋白胨 10.0g, 10.0g,酵母粉 5.0g,葡萄糖 5.0g,乙酸鈉 5.0g,檸檬酸二銨 2.0g,Tween 80 1.0g,K2HPO4 2.0g,MgSO4.7H2O 0.2g,MnSO4.H2O 0.05g,CaCO3 20.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH6.8。生長條件:37℃,兼性厭氧。生長特性G+,球形或卵圓形菌,發(fā)酵山梨醇,不發(fā)酵阿拉伯糖;能在45℃、pH 9.6和6.5%的NaCl培養(yǎng)基:中生長。兼性厭氧,適pH7.4~7.6。存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:試劑級,Ir>52% Saccharomyces│boulardii 中文名稱:博拉迪酵母種屬:Saccharomyces│boulardii提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:釀造食醋培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0013生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:97% Weissella│confusa 中文名稱:融合魏斯氏菌種屬:Weissella│confusa分離基物:泡菜提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于發(fā)酵豆奶的研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0006生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:97% Paenibacilluslautus 中文名稱:燦爛類芽胞桿菌種屬:Paenibacilluslautus分離基物:兒童腸道提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:類芽胞桿菌分類鑒定模式菌株:。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002;營養(yǎng)肉汁瓊脂;蛋白胨5.0g,牛肉浸取物3.0g,NaCl5.0g,瓊脂15.0g,蒸餾水1.0L,pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mgMnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:30℃;好氧存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Poria cocos(Fr.)Wolf 中文名稱:茯苓(斜面)種屬:Poria cocos(Fr.)Wolf提供形式:試管斜面安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:藥用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:17生長條件:28-32℃ 純度:98% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |