產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:溫和氣單胞菌PCR檢測試劑盒規(guī)格 英文名稱:Aeromonas sobriaPCR 編號:HE30588-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 絲蟲病抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 絲氨酸肽酶抑制劑,Kazal 1型試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99,BR 包裝;1g 絲氨酸肽酶2甘露聚糖結(jié)合凝集素試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;250mg 絲氨酸蛋白酶HTRA1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 絲氨酸/蘇氨酸激酶24試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;25g 絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶PAK4試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;5g 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶B-raf試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP30,BR 包裝;500mg 瞬態(tài)電壓感受器陽離子通道,子類V,成員4試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定 包裝;100g 瞬態(tài)電壓感受器陽離子通道,子類V,成員1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分,Sigma A4882 包裝;25g 瞬時(shí)受體電位陽離子通道,亞科C,成員6試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR 包裝;500g 閘蛋白14試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 通道蛋白5試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%%,USP,BR 包裝;5g 通道蛋白4抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 通道蛋白3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;25g 痘帶狀皰疹病毒IgM試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 溫和氣單胞菌PCR檢測試劑盒規(guī)格 Fusobacterium nucleatum subsp nucleatum 中文名稱:具核梭桿菌聚核亞種種屬:Fusobacterium nucleatum subsp nucleatum提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:哥倫比亞血平板(成品)生長條件:37℃,厭氧,24-48h 純度:≥99% Bacillus pasteurii 中文名稱:巴氏芽孢桿菌種屬:Bacillus pasteurii提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CASO +20g/L尿素:蛋白胨 5.0 g,牛肉浸膏 3.0 g , 尿素 20.0 g ,蒸餾水 1.0 L,pH 7.3 。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧 純度:98% Clostridium difficile 中文名稱:艱難梭菌種屬:Clostridium difficile提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基::酪胨15.0g,酵母浸出粉5.0g,葡萄糖5.0g,硫乙醇酸鈉0.5g,L-胱氨酸0.5g,刃天青0.001g,氯化鈉2.5g,pH7.1±0.2。121℃,15min。生長條件:36℃,厭氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Escherichia coli EHEC O157:H7 中文名稱:出血性大腸埃希氏菌 O157:H7種屬:Escherichia coli EHEC O157:H7提供形式:凍干管、試管斜面安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g,蒸餾水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min滅菌。生長條件:37℃,好氧生長特性G-桿菌,賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶均陽性,精氨酸雙水解酶陰性,有動力,IMViC實(shí)驗(yàn):+、+、-、-,尿素酶、苯丙氨酸脫氨酶陰性,不產(chǎn)H2S,不發(fā)酵山梨醇、纖維二糖和側(cè)金盞花醇,MUG陰性,發(fā)酵乳糖、甘露醇。兼性厭氧,適pH7.4~7.6。血清型:O 157 : H 7。存儲條件:4℃,避光冷藏 純度:95% Haemophilus influenzae 中文名稱:流感嗜血桿菌種屬:Haemophilus influenzae分離基物:57歲患者的肺膿瘍提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:質(zhì)控菌株;藥敏的試驗(yàn);呼吸的研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:巧克力平板(成品)生長條件:37℃,5%CO2 純度:天然礦物,晶粒,大約 0.06-19in Kocuria│rhizophila 中文名稱:嗜根考克氏菌種屬:Kocuria│rhizophila提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗生物質(zhì)殘留檢查。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:天然礦物,晶粒,大約 0.06-19in Escherichia coli O157:H7 中文名稱:大腸埃希氏菌O157種屬:Escherichia coli O157:H7提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究;。BBL科瑪嘉質(zhì)控菌株。GB4789.28-2013《食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 培養(yǎng)基:和試劑的質(zhì)量要求》中規(guī)定質(zhì)控菌株。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:37℃,好氧,24h生長特性血清型O157:H7,山梨醇陰性,Vero 細(xì)胸毒素(志賀毒素)陰性。存儲條件:2-8℃ 純度:AR,98% Vibrio harveyi 中文名稱:哈維氏弧菌種屬:Vibrio harveyi分離基物:哈維氏弧菌菌株BB120提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:哈維氏弧菌 BB-170培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:Marine Agar 2216 :蛋白棟 5.00 g ,酵母粉 1.00 g ,F(xiàn)e(III) citrate 0.10 g ,NaCl 19.45 g, 無水MgCl2 5.90 g ,Na2SO4 3.24 g, CaCl2 1.80 g ,KCl 0.55 g, NaHCO3 0.16 g, KBr 0.08 g ,SrCl2 34.00 mg ,H3BO3 22.00 mg, Na-silicate 4.00 mg ,NaF 2.40 mg, (NH4)NO3 1.60 mg ,Na2HPO4 8.00 mg, 蒸餾水 1000.00 ml, pH 7.6 ± 0.2生長條件:30℃,好氧 純度:99% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |