產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:異尖線蟲屬PCR檢測試劑盒規(guī)格 英文名稱:Anisakis spp.PCR 編號:HE30612-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 淋巴細(xì)胞抗原6復(fù)合物基因座A試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;100g 淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;25g 淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;5g 亮氨酰-半胱氨酰氨肽酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g 亮氨酸富含重復(fù)絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 亮氨酸氨基肽酶3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;250mg 鏈激酶試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 連蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 粒細(xì)胞特異性抗核抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;1g 粒細(xì)胞趨化蛋白-2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 包裝;5g 粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>95%,蛋白≤0.1% 包裝;200mg 粒細(xì)胞集落刺激因子試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 包裝;100mg 粒細(xì)胞集落刺激因子試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 利什曼原蟲試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;5g 利鉀尿肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 李斯特菌抗體試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:含量≥670µg/mg 包裝;5g 異尖線蟲屬PCR檢測試劑盒規(guī)格 Salmonella bovis-morbificans 中文名稱:病牛沙門氏菌種屬:Salmonella bovis-morbificans提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:36℃,好氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:無,鱗片, 99.99% metals basis Escherichia│coli EIEC 中文名稱:腸侵襲性大腸埃希氏菌種屬:Escherichia│coli EIEC分離基物:腹瀉病例糞便標(biāo)本提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0002生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:95% Clostridium│saccharobutyricum 中文名稱:糖丁酸梭菌種屬:Clostridium│saccharobutyricum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:提高白酒的丁酸已酯之含量。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0162生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99% Hericium│erinaceus 中文名稱:猴頭菌(猴頭,猴頭蘑,猴頭菇)種屬:Hericium│erinaceus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于食用菌。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0017生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法 純度:99% Paecilomyces│hepiali 中文名稱:蝙蝠蛾擬青霉種屬:Paecilomyces│hepiali提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:藥用,適合液體發(fā)酵法菌絲體。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0017生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法 純度:99% Gordonia│amicalis 中文名稱:友好戈登氏菌種屬:Gordonia│amicalis分離基物:煉油廢污泥提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:油品生物脫硫。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0995生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:Rh 21.3% Penicillium│camemberti 中文名稱:卡門柏青霉種屬:Penicillium│camemberti提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0013生長條件:26℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:Rh 21.3% Salmonella kentucky 中文名稱:肯塔基沙門氏菌種屬:Salmonella kentucky分離基物:進(jìn)口凍雞翼尖提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:36℃,好氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度: 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |