產品屬性: 產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 | 22RV1 (前列腺癌細胞)供應 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | YS-01X6324 |
產品名稱:22RV1 (前列腺癌細胞)供應 規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 生長培養(yǎng)基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 名稱 22RV1 (前列腺癌細胞) (STR鑒定正確) 別稱 22RV1; 22Rv-1; 22rV1; CWR22-Rv1; CWR22R-V1; CWR22-R1; CWR22Rv1; CWR22R 種屬 人類 年齡(性別) 男性,成人 組織來源 前列腺 生長特性 貼壁細胞 細胞形態(tài) 上皮細胞樣 背景描述 22RV1是來自異種移植(在閹割引起前列腺癌衰退又在其父親的雄性激素信賴型CWR22嫁接后復發(fā)的小鼠中連續(xù)傳代)的人前列腺癌上皮細胞系;22RV1細胞系表達前列腺特異抗原。二羥基脂酮輕微刺激22RV1細胞生長,經Western Blot檢測溶解產物與抗雄性激素受體抗體起免疫反應;EGF刺激22RV1細胞生長,但TGFβ-1不能抑制細胞生長;22RV1可在裸鼠中成瘤。 生物安全等級 2 生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~40小時 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice. 受體表達情況 androgen receptor 注意事項 22RV1細胞復蘇時需要離心去除DMSO。凍存細胞復蘇初階段,貼壁量少,成簇松散貼壁,但是終細胞會變平并且擴散成很好的單層,這個過程需要4-5天時間。細胞生長緩慢,細胞只能生長到90%的匯合度。細胞凍存后復蘇成活率不高,推薦凍存液配比為90%血清+10% DMSO,使用優(yōu)質血清。 保藏機構 ATCC; CRL-2505 BCRC; 60545 DSMZ; ACC-438
冷凍保存細胞之方法? 冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;產品僅用于科研 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 實驗報告: 一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 小鼠睪酮(Testoterone)elisa檢測試劑盒 小鼠睪酮(T)elisa檢測試劑盒 小鼠睪酮(T)elisa分析檢測試劑盒 小鼠高鐵血紅蛋白還原酶(MHBR)elisa檢測試劑盒 小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)elisa檢測試劑盒 大鼠前蛋白轉化酶枯草溶菌素1(PCSK1)elisa檢測試劑盒 大鼠前動力蛋白2(PK2)elisa檢測試劑盒 大鼠前動力蛋白2(PROK2)elisa檢測試劑盒 大鼠前動力蛋白受體1(PKR1)elisa檢測試劑盒 大鼠前列環(huán)素(PGI2)elisa檢測試劑盒 22RV1 (前列腺癌細胞)供應兔子可溶性CD40配體試劑盒 兔子可溶性CD40配體試劑盒 規(guī)格型號: 兔子可溶性CD40配體試劑盒,規(guī)格型號:,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid 中文名:喹方 分子式:C9H6INO4S 兔子可溶性CD40配體(sCD40L) 7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one 160129-45-3 中文名: 分子式:C10H10ClNO 兔子抗中性粒細胞顆??贵w試劑盒 兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒 規(guī)格型號: 兔子抗中性粒細胞顆??贵w試劑盒,規(guī)格型號:,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子抗中性粒細胞顆??贵w試劑盒、兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 7α-Hydroxystigmasterol 64998-19-2 中文名:7α-羥基豆甾醇 分子式:C29H48O2 兔子抗中性粒細胞顆??贵w試劑盒 兔子抗中性粒細胞顆??贵w試劑盒 規(guī)格型號: 兔子抗中性粒細胞顆??贵w試劑盒,規(guī)格型號:,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子抗中性粒細胞顆??贵w試劑盒、兔子抗中性粒細胞顆??贵w試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 7α-Hydroxysitosterol 34427-61-7 中文名:7α-羥基谷甾醇 分子式:C29H50O2 兔子抗中性粒細胞顆??贵w(ANGA)試劑盒 7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol 中文名: 分子式:C29H46O3 度:97.5% 培養(yǎng)操作: 1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。 4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類; 1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。 3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |