微生物菌種的培養(yǎng): ⒈ 孢子制備 ⑴ 孢子的制備 一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。 ⑵ 霉菌孢子的制備 霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。 ⒉ 種子制備 ⑴ 搖瓶種子制備 搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。 產品名稱:雜色曲霉 貨號:YS-01J12864 拉丁文: Aspergillus versicolor 提供形式: 凍干物 安全等級: 1 模式菌株: no 應用領域: 霉腐試驗菌。 培養(yǎng)基: CPDA 生長條件: 28-30℃ 存儲條件: 真空冷凍干燥法 產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 雜色曲霉說明書 | Aspergillus versicolor | YS-01J12864 |
公司產品僅用于科研培養(yǎng)及打管說明: 1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。 2、菌株恢復培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內,輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。 3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長 4、復蘇后的菌種在傳1-2代后使用。 5、暫不啟開的安瓿及復蘇后需保藏的斜面應于4℃中保藏。 保存方法: 傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 。 液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。 懸液保存法: ① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。 ② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。 載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。 常用的冷凍保存法: ① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。 ② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。 ③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。 微生物培養(yǎng)方法: 1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。 2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。 上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數,而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟: a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。 b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。 c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。 SESN3 Sestrin3抗體甲基化樣蛋白11抗體(N端) SESN2/Hi95 缺氧誘導基因95抗體大腸癌腫瘤突變蛋白抗體 SESN1/PA26 p53調控PA26核蛋白抗體絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK4抗體 Sertad1 調控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI1抗體苯甲酸肽水解酶抗體 SERPINI2/PI14 蛋白酶抑制劑14抗體磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體 SERPING1/C1 Inactivator 酯酶抑制蛋白C1IN抗體磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶3抗體 SERPINB3 絲氨酸蛋白酶抑制劑B3抗體絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 SERPINB12 絲氨酸蛋白酶抑制劑B12抗體磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 SERPINB11 絲氨酸蛋白酶抑制劑B11抗體磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 SERPINB10 絲氨酸蛋白酶抑制劑B10抗體磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 SERPINB1 絲氨酸蛋白酶抑制劑B1抗體磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 SERPINA12/Vaspin 內臟脂肪組織源性絲氨酸蛋白酶抑制蛋白抗體遷移誘導因子5抗體 SERPIN A11 絲氨酸蛋白酶抑制劑A11抗體致癌基因抗體 SERINC3 絲氨酸合并蛋白3抗體(腫瘤差異表達蛋白)絲裂原活化蛋白激酶MAP4K5抗體 Serca2/SERCA2 ATPase 肌漿/內質網鈣ATP酶2抗體MKLN1抗體 雜色曲霉說明書黑曲霉磷酸化真核啟動因子2α抗體 5-Carboxyfluorescein N-succinimidyl ester 質量規(guī)格:0.9 納西桿菌屬長鏈脂肪酸延長酶ELOVL2抗體 5(6)-Carboxyfluorescein 質量規(guī)格:0.95 乳酸乳球菌乳亞種長鏈脂肪酸延長酶長ELOVL5抗體 5(6)-FAM, SE 質量規(guī)格:>90% 棘孢曲霉有脊椎動物腦發(fā)育相關蛋白Emx1抗體 S-adenosyl-L-methionine (SAM) 質量規(guī)格:BR,純度>96%,干品腺苷蛋氨酸>49% 絳紅鏈霉菌外胚層神經皮層蛋白1抗體 Sulfamonomethoxine 質量規(guī)格:>95%,BR 表皮葡萄球菌烯化酶超家族成員1抗體 Sulfamonomethoxine 質量規(guī)格:含量測定 色鹽桿菌核苷酸內焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體 Strontium Ranelate 質量規(guī)格:HPLC>98% 球形賴氨酸芽孢桿菌內皮活化蛋白受體抗體 GDC0941 質量規(guī)格:>98%,有效的PI3Kα/δ抑制劑
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