產品名稱：長雙歧桿菌豬亞種
貨號：YS-01J12852
拉丁文: Bifidobacterium longum subsp. sius

分離基物: pig faeces

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: yes

應用領域: 模式菌株 of B. suis

培養(yǎng)基: 雙歧桿菌培養(yǎng)基：大豆蛋白胨5.0g，胰胨5.0g，酵母提取物10.0g，葡萄糖10.1g，鹽溶液40.0ml，L-半胱氨酸0.5G， 0.1%刃天青1.0ml， 瓊脂15.0g， 蒸餾水1.0L，pH7.0 鹽溶液：CaCl2 0.2g ，MgSO4·7H2O 0.48g ，K2HPO

公司產品僅用于科研培養(yǎng)及打管說明：

1、安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復培養(yǎng)：用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項：菌種活化前，請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經過冷凍干燥保存后，延遲期較長，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長

4、復蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復蘇后需保藏的斜面應于4℃中保藏。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種，則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內，再放入低溫冰箱內進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內，再置于冰箱內進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

SORBS2/ArgBP2  精氨酸結合蛋白2抗體中胚層誘導早期反應蛋白2抗體

SORBS2/ArgBP2  精氨酸結合蛋白2抗體MDM2樣P53蛋白結合抗體

Somatostatin/GRIH  生長抑素抗體RNA相關結合蛋白MCG10抗體

Solute carrier family 1  溶質攜帶物家族-1抗體線粒體核糖體蛋白S4抗體

SODD  Bcl2結合抗凋亡蛋白4抗體緊密連接蛋白MUPP1抗體

SOD4/CCS  超氧化物歧化酶4抗體肌管素相關蛋白14抗體

SOD3  超氧化物歧化酶3抗體小腦癥基因1/認知相關蛋白抗體

SOD2  超氧化物歧化酶2抗體鋅指蛋白60抗體

SOD1/SOD  超氧化物歧化酶1抗體(銅/鋅過氧化物歧化酶SOD)肌球蛋白6抗體

Socs 3  因子信號傳導抑制蛋白3抗體肌肉素抗體

Socs 2  因子信號傳導抑制蛋白2抗體代謝型谷氨酸受體-3抗體

Socs 1  因子信號傳導抑制蛋白1抗體促代謝型谷氨酸受體2+3抗體

SOAT2/ACAT2  膽固?；D移酶2抗體促代謝型谷氨酸受體1+5抗體

SOAT1/ACAT1  膽固?；D移酶1抗體MHC I類鏈相關蛋白A/組織相容性復合物MHCIa抗體

SNX27  SNX27蛋白抗體肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體
長雙歧桿菌豬亞種說明書產馬乳酒乳桿菌高加索酸奶粒亞種橋粒芯蛋白3抗體 Acid Red 88 質量規(guī)格：AR,進分

白孢鏈霉菌逝霉素變種癌基因刪除蛋白2抗體 Acid Red 183 質量規(guī)格：AR,

半裸鐮孢菌DNA損傷誘導轉錄蛋白4抗體 Acid Red 9 質量規(guī)格：AR,進分

細黃鏈霉菌乳糖變種癌相關蛋白DRES17抗體 Malachite green 質量規(guī)格：BS

大腸埃希氏菌周期調控蛋白SDP35抗體 Brilliant green 質量規(guī)格：BS

枯草芽孢桿菌枯草亞種DNA損傷自噬調整蛋白抗體 Methyl Green 質量規(guī)格：BS

近平滑假絲酵母腦發(fā)育同源蛋白1抗體 Alizarin green 質量規(guī)格：BS

粉紅擲孢酵母間粘附分子非整合素蛋白3抗體 Naphthol Green B 質量規(guī)格：BS
微生物培養(yǎng)方法：

1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。

2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。

上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù)，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜，對平板的要求比較高，可參照以下步驟：

a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。

b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。

c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展，使之分布均勻。