產(chǎn)品名稱:大片吸蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱:Fasciola spp.PCR 編號(hào):HE30983-R 類別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 無(wú)三氯化鐵/無(wú)氯化高鐵/無(wú)氯化鐵/Iron(III) chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;25g 氯化鎳/氯化鎳/氯化亞鎳/二氯化鎳/鎳鉻合金氯化物/氯化鎳(II)物/Nickel chloride hexahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物激素級(jí) 包裝;500g 氯化亞錫/二氯化錫/結(jié)晶氯化亞錫/氯化錫(II)二合物/Stannic chloride dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;1g 無(wú)二氯化錫/無(wú)氯化亞錫/氯化錫(II)/Tin(II) chloride anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:Ind Grade 包裝;5g 四氯化錫/結(jié)晶四氯化錫/氯化高錫/五四氯化錫/結(jié)晶氯化錫/Stannic chloride pentahydrate 質(zhì)量規(guī)格:BS Grade 包裝;1g 氯化鋅/鋅氯粉/Zinc chloride 質(zhì)量規(guī)格:>80%,Ind Grade 包裝;25g 氯化鉍/三氯化鉍/氯化鉍(III)/Bismuth Chloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 氯化鉻/三氯化鉻/六氯化鉻/三氯化鉻(III)/Chromic chloride hexahydrate 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;100g 無(wú)氯化鉻(III)/無(wú)三氯化鉻/無(wú)三氯化鉻(III)/Chromium(III) chloride anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;25g 氯化銦/三氯化銦/Indium chloride 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;5g 氯化亞鐵/二氯化鐵/氯化鐵四合物/四氯化低鐵/氯化鐵(II)四合物/Iron(II) chloride tetrahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>96%,Tech Grade 包裝;1g 氯化鉛/二氯化鉛/氯化鉛(Ⅱ)/Lead chloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 四氯化錳/氯化亞錳/二氯化錳/氯化錳(II)四合物/Manganese chloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 氯化亞汞/一(I)/一氯化亞汞(I)/氯化亞汞(I)/Mercuric chloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;25g 氯化銀/Silver chloride 質(zhì)量規(guī)格:85%~95%,BR 包裝;5g 氯化鍶/六氯化鍶/二氯化鍶/Strontium chloride hexahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 包裝;1g 氯化銣/Rubidium chloride 質(zhì)量規(guī)格:商品級(jí) 包裝;25g 大片吸蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒Trametes│sp. 中文名稱:栓菌屬種屬:Trametes│sp.提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗癌活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:97% Fusarium│solani 中文名稱:茄病鐮刀菌種屬:Fusarium│solani提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:Cyclosporin(環(huán)孢菌素)產(chǎn)生菌;用于環(huán)孢菌素A、C、D、H等培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0066生長(zhǎng)條件:26-28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:97% Clostridium sporogenes 中文名稱:產(chǎn)芽孢梭菌種屬:Clostridium sporogenes提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:教學(xué)科研培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0121生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:96% Salmonella│paratyphi A 中文名稱:甲型副傷寒沙門氏菌種屬:Salmonella│paratyphi A提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1,2,12 a -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:96% Streptococcus hemolytis-α 中文名稱:甲型溶血性鏈球菌種屬:Streptococcus hemolytis-α分離基物:來源于衛(wèi)生部檢定所,分離自慢性氣管炎患者。提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究;教學(xué);分類。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:哥倫比亞血平板生長(zhǎng)條件:37℃,好氧 / 5%CO2生長(zhǎng)特性卵圓形或球形的,直徑小于2μm。當(dāng)生長(zhǎng)在液體培養(yǎng)基:中時(shí),形成對(duì)或鏈。革蘭氏染色陽(yáng)性。兼性厭氧菌。適溫度37℃?;墚愷B(yǎng)菌。從不形成菌膜,不含有血紅素化合物。聯(lián)陰性,觸酶陰性。在5%羊血培養(yǎng)基:上α溶血。低營(yíng)養(yǎng)要求復(fù)雜。存儲(chǔ)條件:2-8℃。真空冷凍干燥法 純度:96% Salmonella enteritidis 中文名稱:腸炎沙門氏菌種屬:Salmonella enteritidis提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究;教學(xué);分類。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長(zhǎng)條件:37℃,好氧。生長(zhǎng)特性革蘭氏陰性桿菌,大小為0.6-2.0μm × 1.0-4.0μm,通常以周生鞭毛運(yùn)動(dòng);兼性厭氧,營(yíng)養(yǎng)要求不高;不能利用檸檬酸鹽作為碳源;產(chǎn)氣,大多數(shù)菌株不產(chǎn)生H2S,發(fā)酵阿拉伯糖而不發(fā)酵木糖,僅對(duì)人致病,能夠引起與傷寒類似的癥狀。存儲(chǔ)條件:2-8℃。-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Bacillus cereus 中文名稱:蠟樣芽孢桿菌種屬:Bacillus cereus提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)青霉素酶,四環(huán)素,胃癌普查培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長(zhǎng)條件:37℃,兼性厭氧生長(zhǎng)特性革蘭氏陽(yáng)性桿菌,0.3-2.2μm×1.2-7.0μm,多數(shù)運(yùn)動(dòng),鞭毛典型側(cè)生。形成抗熱內(nèi)生孢子;在一個(gè)孢子囊細(xì)胞中,孢子不多于1個(gè)。嚴(yán)格好氧或兼性厭氧。來源于中國(guó)藥品生物制品檢定所抗生素室。存儲(chǔ)條件:2-8℃。-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:97% Serratia marcescens 中文名稱:黏質(zhì)沙雷氏菌種屬:Serratia marcescens分離基物:來源于第二軍醫(yī)大學(xué)提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長(zhǎng)條件:37℃生長(zhǎng)特性菌落橙色。革蘭氏陰性桿菌,以周生鞭毛運(yùn)動(dòng),無(wú)芽胞,能利用檸檬酸鹽和醋酸鹽作為碳源,可產(chǎn)生粉色、紅色或深紅素,營(yíng)養(yǎng)要求不高;V. P.反應(yīng)陽(yáng)性,M. R.反應(yīng)陰性;產(chǎn)生脫氧核糖核酸酶;可自土壤、、人和動(dòng)物的糞便中分離到,可引起肺炎、泌尿道感染、敗血癥,以及外科術(shù)后感染。存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:97% |