特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產(chǎn)品名稱 | 奈瑟菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Neisseria spp. | 貨號(hào) | YSP96996 |
熒光染料的優(yōu)點(diǎn): 產(chǎn)品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合; 價(jià)格便宜; 熒光染料的缺點(diǎn): 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性 非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。 正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí),引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。 當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí),Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。 TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。 TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn): 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn): 成本高; 設(shè)計(jì)難度大; 只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術(shù)的定量原理: 擴(kuò)增曲線 在Real- qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。 在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。 PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。 一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 AMBN 英文名稱: 釉基質(zhì)蛋白抗體 0.2ml 犬瘟熱病毒RT-PCR檢測試劑盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T 銀杏內(nèi)酯BGinkgolide B15291-77-720mgHPLC≥98% 銀杏內(nèi)酯CGinkgolide C15291-76-620mgHPLC≥98% 銀杏內(nèi)酯J;白果苦內(nèi)酯?JGinkgolide J107438-79-920mgHPLC≥98% 銀杏素;白果雙黃酮,銀杏雙黃酮,銀杏黃素Ginkgetin481-46-920mgHPLC≥98% 銀杏酸(C13:0);白果新酸Ginkgolic Acid (C13:0)20261-38-520mgHPLC≥98% 銀杏酸(C15:1);白果新酸;銀杏酸Ginkgolic Acid (C15:1)22910-60-720mgHPLC≥98% 藿次苷IIcarisid I56725-99-620mgHPLC≥98% 次苷II;寶藿苷IIcarisid II;BaohuosideI113558-15-920mgHPLC≥98% 藿苷Icariin489-32-720mgHPLC≥98% 藿素Icaritin5240-95-920mgHPLC≥98% Anti-Aromatase P450/FITC 熒光素標(biāo)記芳香化酶/細(xì)胞色素P450/P450抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml f- BetaCG ELISA Kit 大鼠游離β絨毛膜促性腺激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T Anti-ART/FITC 熒光素標(biāo)記膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子GDNF的一種抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml Rhesus antibody Rh FAM123B/AMER1/Wilms tumor on the X 腎母細(xì)胞瘤基因X染色體蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml ALP(Mouse alkaline phosphatase) ELISA Kit 小鼠堿性酸酶 96T MRP1 英文名稱: 多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml C17orf53 英文名稱: 17號(hào)染色體開放閱讀框53抗體 0.2ml Anti-Osterix 成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml MMP-9/Gelatinase B(Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶BMulti-class antibodies規(guī)格: 48T Anti-claudin 5 緊密連接蛋白-5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml Rhesus antibody Rh IEX1/Differentiation dependent gene 2 protein 分化相關(guān)基因2蛋白/立即早期反應(yīng)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml IFA(Human intrinsic factor antibody) ELISA Kit 人抗內(nèi)因子抗體 96T PCDHA1 英文名稱: 原鈣粘附蛋白α1抗體 0.2ml PR 單克隆抗體PR Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul α平滑肌肌動(dòng)蛋白 單克隆抗體α-SMA Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul α平滑肌肌動(dòng)蛋白 單克隆抗體α-SMA Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul Caspase-8 單克隆抗體Caspase-8 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 羥基酸氧化酶1 單克隆抗體HAO1 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 生長相關(guān)蛋白43 單克隆抗體GAP-43 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 奈瑟菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒細(xì)胞內(nèi)離子通道蛋白4抗體TRH/FITC 熒光素標(biāo)記促甲狀腺素釋放激素抗體IgG100 ul 細(xì)胞生長調(diào)控蛋白19/環(huán)指蛋白197抗體TRIM32/FITC 熒光素標(biāo)記TRIM32抗體IgG20 ul 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白139抗體TrK A/FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸激酶A抗體IgG100 ul 染色體修飾蛋白1抗體(金屬蛋白酶1)TrK A.B.C/TrK /FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸激酶A.B.C抗體IgG20 ul 鈣依賴分泌激活蛋白1抗體Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) /FITC 熒光素標(biāo)記酸化酪氨酸激酶A抗體IgG100 ul 小腦肽1抗體Trk B/FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸激酶B抗體IgG500 ul 小腦肽2抗體Trk B/FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸激酶B抗體IgG100 ul 小腦肽4抗體Trk C/FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸激酶C抗體IgG100 ul 腦海綿狀血管畸形蛋白2抗體Trop-2/gp50/Tpm2 /FITC 熒光素標(biāo)記原肌球蛋白抗體IgG100 ug |