熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
加拿大香脂PSMB8/LMP7 (D1K7X) Rabbit mAb甲氧基-酚

正己酸(>98%，BR)Camptothecin鹽酸莫西沙星

己內(nèi)酰(>98%，BR)Phospho-GKAP (Ser346) AntibodyN,O-1,二乙酰基吲哚

羧肽酶 Y >50 U /mgVAMP3 Antibody溴乙

蓖麻油MED26 Antibody基酸頻哪酯

1,1-環(huán)己基二乙酸PKCθ (E1I7Y) Rabbit mAb1,二甲基二甲

反式-1,2-環(huán)己二四乙酸(>98%，BR)STING (D2P2F) Rabbit mAb并咪唑-5-甲酸甲酯

乙酸纖維素Langerin (D9H7R) XP® Rabbit mAb2,6-二溴

乙酸鈰(>99%，BR)Langerin (D9H7R) XP® Rabbit mAb反式-1,環(huán)已烷二甲

硫酸鈰四水(>99%，BR)SimpleChIP® Human β-Actin Promor Primers2-溴-5-氟甲

碳酸銫(>99%，BR)Stathmin (D1Y5A) Rabbit mAb3,5-二氯異酸酯

滂天藍(~50%,BS)IκBα (L35A5) Mouse mAb (Amino-rminal Antigen) (Pacific Blue™ Conjuga)環(huán)乙酸

氯銨-T三水(>98%,BR)VCAM-1 (E1E8X) Rabbit mAb一水右旋美沙芬

卡拉唑黑E(>70%,BS)ZO-1 (D6L1E) Rabbit mAb5-乙酰-2-氟

氯金酸三水PI3 Kinase p85α (6G10) Mouse mAb溴-5-氟-2-

氯鉑酸六水MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb式醋酸鉛

乙酸膽固酯(>96%,BR)MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb基-三氟甲基吡啶

硬脂酸膽固酯(>98%,BR)SimpleChIP® Human β-Actin 3' UTR Primers(S)-二甲基氨基-
牛結(jié)節(jié)疹病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒剛地弓形蟲(T.gondii)ELISA試劑盒GRK2/BARK1  G蛋白偶合受體激酶2抗體100 ul

肝脂酶(HL)ELISA試劑盒GRIM19  干擾素/維甲酸誘導凋亡相關基因抗體100 ul

肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)ELISA試劑盒GRM1  促代謝型谷氨酸受體1抗體100 ul

肝臟甘油三脂脂肪酶(HTGL)ELISA試劑盒GRM2/GLUR2  促代謝型谷氨酸受體2抗體100 ul

肝細胞生長因子受體(c-MET/HGFR)ELISA試劑盒Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr869/873/876)  酸化促代謝型谷氨酸受體2抗體100 ul

肝細胞生長因子激活物(HGFA)ELISA試劑盒Phospho-GRM2/GLUR2 (Tyr876)   酸化促代謝型谷氨酸受體2抗體100 ul

肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒GRM3  促代謝型谷氨酸受體M3抗體100 ul

肝細胞核因子1β(HNF-1B)ELISA試劑盒GRM4/mGluR4  促代謝型谷氨酸受體4抗體20 ul

肝素-血小板因子4復合物抗體(IgG)ELISA試劑盒GRM5/mGluR5  促代謝型谷氨酸受體5抗體100 ul
PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。