產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:犬諾瓦克病毒PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Canine Norovirus PCR 編號:HE30781-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 ? 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 姜黃素 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable) 質(zhì)量規(guī)格:0.98 包裝;1g 姜黃素 CURCUMIN(P)(Compendial Traceable) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,一物,BR 包裝;500mg 姜黃素 CURCUMIN(RG)(REQUEST QUOTE) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g 姜黃素 CURCUMIN(AS) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100mg 姜黃素 CURCUMIN(AS) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,MET抑制劑 包裝;500mg 姜黃素 CURCUMIN(AS) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g (+)-花側(cè)柏烯 CUPARENE, (+)-(RG) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g CUPRESSUFLAVONE(SH) 質(zhì)量規(guī)格:0.99 包裝;1g 4-異丙苯甲醇 CUMINYLALCOHOL(AS) 質(zhì)量規(guī)格:0.98 包裝;250mg 4-異丙苯甲醇 CUMINYLALCOHOL(AS) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;50ml 4-異丙 CUMINALDEHYDE(SG) 質(zhì)量規(guī)格:0.99 包裝;1g 4-異丙 CUMINALDEHYDE(SG) 質(zhì)量規(guī)格:0.95 包裝;1g 葫蘆素 B CUCURBITACIN B(P) 質(zhì)量規(guī)格:0.99 包裝;10g 矢車菊素-3-槐糖苷 CYANIDIN-3-O-SOPHOROSIDE CHLORIDE(SH) 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,美國進口 包裝;50g 矢車菊素-3-O-桑布雙糖苷 CYANIDIN-3-O-SAMBUBIOSIDE(SH) 質(zhì)量規(guī)格:0.97 包裝;1g CYANIDIN-3-O-LATHYROSIDE CHLORIDE(SH) 質(zhì)量規(guī)格:0.99 包裝;250mg 矢車菊素-3-O-阿拉伯糖苷 CYANIDIN-3-O-ARABINOSIDE(SH)(PLEASE CALL) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 犬諾瓦克病毒PCR檢測試劑盒說明書Microporus│affinis (Blume & T. Nees) Kuntze 中文名稱:扇形小孔菌種屬:Microporus│affinis (Blume & T. Nees) Kuntze分離基物:土坡上提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:150生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98% Fusarium│subglutinans (Wollenw. & Reinking) P.E. Nelson To 中文名稱:亞粘團串珠鐮孢種屬:Fusarium│subglutinans (Wollenw. & Reinking) P.E. Nelson To分離基物:玉米提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:進行分析檢測及抗病性鑒定,指導。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97% Fusarium│tumidum var. humi Reinking 中文名稱:土生寬鐮孢霉種屬:Fusarium│tumidum var. humi Reinking分離基物:華石斛根部提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98% Tricholoma matsutake (S. Ito & S. Imai) Singer 中文名稱:松口蘑(斜面)種屬:Tricholoma matsutake (S. Ito & S. Imai) Singer提供形式:斜面安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:22℃,好氧。 純度:98% Coprinellus radians (Desm.) Vilgalys, Hopple & Jacq. Johnson 中文名稱:福毛鬼傘(斜面)種屬:Coprinellus radians (Desm.) Vilgalys, Hopple & Jacq. Johnson分離基物:采集地:河南提供形式:僅提供斜面安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25,好氧 純度:98% Gibberella zeae (Schwein.) Petch 中文名稱:禾谷鐮孢菌(斜面)種屬:Gibberella zeae (Schwein.) Petch提供形式:斜面安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然,121℃,15min。生長條件:28,,3-5天 純度:98% Macrolepiota│albuminosa (Berk.) Pegler 中文名稱:雞縱菌種屬:Macrolepiota│albuminosa (Berk.) Pegler分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法 純度:97%,含0.05% 四溴雙酚A 穩(wěn)定劑 Agaricus│blazei Murrill 中文名稱:巴西蘑菇種屬:Agaricus│blazei Murrill分離基物:子實體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法 純度:97%,含0.05% 四溴雙酚A 穩(wěn)定劑 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |