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大片吸蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-11-27
點擊次數(shù):
615
產(chǎn)品特點:
大片吸蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次大片吸蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

大片吸蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Fasciola gigantica

貨號

 YSP96707

熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
?
熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點:
成本高;
設(shè)計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
磺間二甲氧嘧啶鈉(標準品)Phospho-cdc25C (Ser216) (63F9) Rabbit mAb2-氟-6-溴

毛地黃毒苷配基Phospho-cdc25C (Ser216) (63F9) Rabbit mAb2-氟-6-甲

柯諾辛PI4 Kinase Antibody(S)-1-BOC-2-哌甲酸甲酯

烏拉地爾(標準品)Nanog (D73G4) XP® Rabbit mAb溴-氟甲

夫西地酸鈉Nanog (D73G4) XP® Rabbit mAb2-甲基-5-溴甲酸甲酯

夫西地酸鈉(標準品)Stat3 (79D7) Rabbit mAb6-溴吲唑

3,5-二-L-酪氨酸Stat3 (79D7) Rabbit mAb對十二烷基磺酰疊氮

氟氯西林鈉(標準品)Ezh2 Antibody四溴雙酚 A

巴利森苷A;派立辛LAMP2 (D5C2P) Rabbit mAb1-羥基并三唑一水物

山楂酸,馬斯里酸Hamartin/TSC1 Antibody二-聯(lián)共晶

2-基并咪唑-5-磺酸,紫外線吸收劑 UV-TPhospho-Stat3 (Ser727) (D8C2Z) Rabbit mAb (Biotinylad)異基酸

毛萼乙素Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (APC Conjuga)雙酚 A

知母皂苷元53BP1 (P550) Antibody二二氯硅烷

4'-去甲鬼臼毒素Tri-Methyl-Histone H3 (Lys36) (D5A7) XP® Rabbit mAb過氧化氫異

杠柳毒苷Tri-Methyl-Histone H3 (Lys36) (D5A7) XP® Rabbit mAb多聚酸

1,2-二亞油酰甘油Phospho-Wee1 (Ser642) (D47G5) Rabbit mAb2-甲?;?氧代酸乙酯

基-N-乙酰-β-D-氨基半糖苷Phospho-Wee1 (Ser642) (D47G5) Rabbit mAb2-蒎

2-溴咪唑并[1,2-a]吡Phospho-YAP (Ser127) Antibody甲基酸甲酯
大片吸蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒激活素受體1A抗體Bcl-xL/FITC  熒光素標記抗Bcl-xL蛋白抗體IgG100 ul

激活素受體2A抗體p-Bcl-xL(phospho-Ser62)/FITC  熒光素標記抗酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗體IgG20 ul

激活素受體2B抗體Phospho-Bcl-2 (p-Thr56) /FITC  熒光素標記兔抗、大、Bcl-2抗體IgG100 ul

2號染色體開放閱讀框88抗體Phospho-Bcl-2 (p-Ser70) /FITC  熒光素標記兔抗、大、Bcl-2抗體IgG100 ul

G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體Bcl-6/Bcl-5/FITC  熒光素標記兔抗、大、原癌基因Bcl-6抗體IgG100 ul

激活素受體1B抗體Bcl-10/CLAP/FITC  熒光素標記兔抗、大、Bcl-10抗體IgG20 ul

雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體Bcl-10(phospho Ser218)/FITC  熒光素標記兔抗、大、Bcl-10抗體IgG100 ul

淀粉樣肽前體蛋白抗體(C端)Bcr/CD3D/FITC  熒光素標記兔抗、大、T淋巴細胞受體抗體IgG100 ul

腺苷酸環(huán)化酶2抗體Phospho-Bcr(p-Tyr177)/FITC  熒光素標記兔抗、大、T淋巴細胞受體抗體IgG100 ul

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 大片吸蟲 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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