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腸致病性大腸埃希氏菌菌種傳代

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更新日期:
2021-11-17
點擊次數(shù):
727
產(chǎn)品特點:
腸致病性大腸埃希氏菌菌種傳代是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
  腸致病性大腸埃希氏菌菌種傳代的詳細(xì)資料:

微生物菌種的培養(yǎng):

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。

⑵ 霉菌孢子的制備 

霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備 

搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

產(chǎn)品名稱:腸致病性大腸埃希氏菌
貨號:YS-01J13490
拉丁文: Escherichia coli EPEC

分離基物: 腹瀉病例糞便標(biāo)本

提供形式: 凍干物

安全等級: 2

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。

生長條件: 37℃,好氧

存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

腸致病性大腸埃希氏菌菌種傳代

Escherichia coli EPEC 

YS-01J13490

公司產(chǎn)品僅用于科研培養(yǎng)及打管說明:

1、安瓿瓶開封:用浸過75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項:菌種活化前,請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。圖片3.png

保存方法:

傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣

液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法:

① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法:

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。圖片4.png

微生物培養(yǎng)方法:

1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。

2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。

上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:

a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。

b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。

c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。

兔天青殺素1(AZU1)  4-溴噻吩-2-甲(>98.0%(GC))染色體分離調(diào)節(jié)蛋白1抗體

兔抑制蛋白β1(ARRβ1)苯并[b]噻吩-2-基酸(含有數(shù)量不等的酸酐)復(fù)制激活因子C1抗體

兔早老素2(PS2) 2-(2-吡啶基)苯并[b]噻吩(>97.0%(HPLC)(N))復(fù)制激活因子C2抗體

兔蛋白磷酸酶1調(diào)控亞基1A(PPP1R1A)5-溴苯并[b]噻吩(>98.0%(GC))B淋巴受體相關(guān)蛋白抗體

兔胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14) 2-氯噻吩(>95.0%(GC))磷酸化急性髓白血病1蛋白抗體

兔間隙連接蛋白β1(GJβ1)5-氯噻吩-2-甲(>95.0%(GC))受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶3抗體

兔著絲粒蛋白E(CENPE) 5-氟五氯乙烷(97.0-112.5 %(T))胰島素單克隆抗體

兔凝血因子Ⅹ(F10) 2-氯-5-甲基噻吩(>96.0%(GC))磷酸化視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白1抗體

兔膽囊收縮素/腸促胰酶肽A受體(CCKAR) 2,3-二溴噻吩(>95.0%(GC))磷酸化視網(wǎng)膜母瘤相關(guān)蛋白1抗體

兔蛋白激酶C-η(PKCη)2,5-二溴噻吩(>95.0%(GC))精神分裂癥相關(guān)蛋白9抗體

兔線粒體肌酸激酶1A(CKMT1A)  2,5-二甲基噻吩(>98.0%(GC))周期依賴性激酶抑制相關(guān)蛋白抗體

兔碳酸酐酶XII(CA12)3,4-二溴噻吩(>98.0%(GC))RNA結(jié)合蛋白38抗體

兔抗角蛋白抗體(AKA) 2,8-二甲基二苯并噻吩(>95.0%(GC))松弛肽/松弛素抗體

兔血管緊張素I(ANG I) 2,5-二噻吩(>97.0%(GC))腎酶抗體

兔組織蛋白酶B(CTSB)2,5-二苯基噻吩(>98.0%(GC))環(huán)指蛋白20抗體

兔周期素依賴性激酶5(CDK5) 3,4-二己基噻吩(>97.0%(GC))RAN結(jié)合蛋白1抗體
腸致病性大腸埃希氏菌菌種傳代威爾酵母磷酸化核糖體S6K2蛋白激酶抗體

謝瓦散囊菌磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體

小克銀漢霉C0磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體

植物乳桿菌磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體

酸魚乳桿菌磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體

卷枝毛霉卷枝變型磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體

毛柄金錢菌(金針菇)磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體

黑曲霉磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體


產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 腸致病性大腸埃希氏菌 科研菌種
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