特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
癸二酸二乙酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))IKKβ (L570) Antibody5-溴-2-氟酚

2,二氯酚(standard for GC,≥99.5%(GC))Calnexin (C5C9) Rabbit mAb三乙四

二乙二單甲(standard for GC)Calnexin (C5C9) Rabbit mAb(S)-叔亮氨

二乙二乙(Standard for GC, ≥99.5% (GC))p35/25 (C64B10) Rabbit mAb(+)-二異松蒎基氯烷

對(duì)二氯(Standard for GC,>99.5%(GC))Acetyl-Histone H3 (Lys14) (D4B9) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)環(huán)己甲酰

二十二烷(standard for GC,≥99.0%(GC))IKKα Antibody1,二氮雜環(huán)庚烷-1-甲酸叔丁酯

三十二烷(standard for GC,≥98.0%(GC))Phospho-Atg13 (Ser355) (D6J1W) Rabbit mAb二縮三乙二

正癸烷(standard for GC,≥99.5%(GC))PKCε (22B10) Rabbit mAb甲氧基吡啶-N-氧化物

1,1-二氯乙烷(Standard for GC,≥99.5%(GC))IKKβ Antibody癸基溴

2，2-二甲基丁烷(Standard for GC,≥99.5%(GC))IKKγ Antibody1-癸

2,二甲基丁烷(Standard for GC,>99.5%(GC))OGDH (E1W8H) Rabbit mAb3,二甲基谷酰

甲(Standard for GC)Phospho-IKKγ (Ser376) Antibody2,6-二甲

甲酸(Standard for GC,>99%)IKKε Antibody十一烷酸

呋喃(standard for GC,≥99.5%(GC))IKKε Antibody十二

正庚烷(Standard for GC,>99.5%(GC))PRAS40 (D23C7) XP® Rabbit mAb十二

正庚(Standard for GC,>99.5%(GC))PRAS40 (D23C7) XP® Rabbit mAb甲二甲縮

γ -丁內(nèi)酯（GBL）(standard for GC,≥99.9%(GC))Phospho-Smad2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb (PE Conjuga)對(duì)酸甲酯

1-己(Standard for GC)Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody II溴代十四烷
馬梭菌探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒25羥基維生素D2(25 HVD2)ELISA試劑盒NF-66  α-中連蛋白抗體20 ul

20S蛋白酶體(20SP)ELISA試劑盒NF-L/68kDa neurofilament  低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體100 ul

2,3-二酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒NF-M  中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體20 ul

2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒NGAL/Lipocalin 2  脂質(zhì)運(yùn)載蛋白抗體100 ul

2 型次核苷酸脫氫酶(IMPDH)(IMPDH2)ELISA試劑盒NF-KappaB p105  細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體20 ul

Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒Phospho-NF-KappaB p105 (Ser927)  酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體2.5 mg

Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒Phospho-NF-KappaB p105 (Ser933)  酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體100 ul

Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒NGFR/p75NTR  神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體抗體100 ul

Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(CTX-I)ELISA試劑盒NGF-beta  神經(jīng)生長(zhǎng)因子-β抗體100 ul