熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
脂酰甘油酸合酶1(PGS1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　肉桂鏈霉菌　5g

脂肪酶H(LIPH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　90%　羊巴貝斯蟲（天祝株）　1g

脂肪酶I(LIPI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　90%　糖化酵母　5g

胰輔脂酶(CLPS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　>98.0%(GC)　側(cè)耳　1g

順式還原酮加雙氧酶1(ADI1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　>98.0%(GC)　綠色木霉　250mg

彈性蛋白酶(ELA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　芽孢桿菌屬　1g

彈性蛋白酶3A(ELA3A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　硬毛栓孔菌　5g

糜蛋白酶原B1(CTRB1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　拜氏色鹽桿菌　25g

糜蛋白酶原B2(CTRB2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　多根硬皮馬勃　5g

中心體肌動(dòng)蛋白β(CTRN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　釀酒酵母　25g

天冬氨酸甲氨酰轉(zhuǎn)移酶(ATCase)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　平菇　5g

胎盤膠原凝集素1(CLP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%(GC)　芽枝狀枝孢　1g

肌糖β(SGCβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　小馬勃　1g

肌糖δ(SGCδ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　溶藻弧菌　250mg

肌糖ε(SGCε)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥95%　蟬花*　1g

肌糖γ(SGCγ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥95%　哈茨木霉　25g

肌糖ζ(SGCζ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥95%　閃光須霉　5g

凋亡抑制因子5(API5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　腸炎沙門氏菌　1g
疥螨通用探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒酸化表皮生長因子受體抗體TDP-43/TARDBP (tar DNA binding proin)  Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗原1 Kit

肝配蛋白A1受體抗體nascin  固生蛋白抗原100 ul

真核翻譯起始因子2C2抗體M 1/CD248(Tumor endothelial marker 1 precursor)  內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液酸蛋白抗原20 ul

眼睛發(fā)育缺失蛋白EYA2抗體TFF3 (trefoil factor3)  三葉肽因子3(多肽)100 ul

EYA4蛋白抗體TFPI-2 (tissue factor pathway inhibitor-2)  組織因子途徑抑制劑-2抗原100 ul

血清反應(yīng)因子輔助蛋白1抗體TIEG1/KLF10(TGF-beta inducible early response gene 1)  TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗原100 ul

吞噬細(xì)胞運(yùn)動(dòng)蛋白2抗體TGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I)  轉(zhuǎn)移生長因子–β受體1抗原20 ul

紅細(xì)胞膜條帶4.1蛋白抗體Thioredoxin 1(ERdj5)  硫氧還蛋白抗原100 ul

酸化紅細(xì)胞生成素受體抗體Tie1/JTK14 peptide  上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1抗原100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。