熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
α-巰基甘油(>98.0%(GC)(T))β-Amyloid (1-43 Preferred) (E8C2D) Rabbit mAb六氟酸鈉

二乙(>99.0%(GC))Mic-1 (L300) Antibody4,6-二氯-5-氟嘧啶

甲(>99.0%(GC))Phospho-Etk (Tyr40) Antibody2-氯-6-甲酸

2-基正辛(>98.0%(GC))CD45 (HI30) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjuga)(S)-(-)-2-羧基環(huán)丁

氨基-羥基甲酸(>97.0%(HPLC)(T))AP-2α (C83E10) Rabbit mAb正己基鋰

反-2-[(叔丁基基)-2-甲基-2-亞基]二(>98.0%(HPLC)(N))Dvl2 Antibody2-二環(huán)己膦基-2'-(N,N-二)-聯(lián)

α-基-羥基肉桂酸(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-NDRG1 (Thr346) Antibody氯-甲

3,5-二甲氧基-羥基肉桂酸(>99.0%(GC)(T))CD45 (D9M8I) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 700 Conjuga)2'-乙酮

2,5-二羥基甲酸(>99.0%(GC)(T))Dvl3 Antibody2,3,三羥基甲

4'-羥基偶氮-2-羧酸(>98.0%(HPLC)(T))Dvl3 Antibody2-乙酰-5-溴吡啶

羥基-2-吡啶甲酸(>98.0%(T))TRAIL (C92B9) Rabbit mAb3,5-二甲氧基甲酸甲酯

4'-羥基偶氮基-羧酸水合物(>98.0%(HPLC)(T))Ret Antibody2,5-二羥基甲酸甲酯

吲哚酸(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-Ret (Tyr905) Antibody2-氯-5-羥甲基吡啶

2',4',6'-三羥基乙酮一水合物(>98.0%(GC))Ret (C31B4) Rabbit mAb乙基酸

2-氨基甲酰(>98.0%(HPLC)(T))Dvl2 (30D2) Rabbit mAb乙酰氨基磺酰疊氮

羧氧基半鹽酸鹽(>98.0%(T))Dvl2 (30D2) Rabbit mAb溴-2-氟磺酰氯

2-氟-1-甲基吡啶鎓對(duì)甲磺酸鹽(>98.0%(T))TAB1 (C25E9) Rabbit mAb氧雜環(huán)丁

1-(5-氟-2,二基)-甲基哌(>98.0%(HPLC)(T))GβL Antibody羧基噠
馬克洛菌探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒雞H5型病毒(H5N1)抗體(IgG)ELISA試劑盒PLGF/PIGF (human)  胎盤生長相關(guān)抗體（）100 ul

雞G0/G1期開關(guān)基因(G0S2)ELISA試劑盒PLGF/PIGF (mouse, rat, pig)  胎盤生長因子抗體（、、豬）100 ul

雞FAM172A蛋白(FAM172A)ELISA試劑盒PLGF  胎盤生長因子抗體20 ul

雞C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒PLK1/STPK13  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體100 ul

雞CD8分子(CD8)ELISA試劑盒Phospho-PLK1 (Thr210)  酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體100 ul

雞CD4分子(CD4)ELISA試劑盒Phospho-PLK1 (Ser137)  酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體100 ul

雞CD3分子(CD3)ELISA試劑盒PMP22  外周髓鞘蛋白-22抗體100 ul

雞B因子(BF)ELISA試劑盒PMS2  腫瘤錯(cuò)配修復(fù)基因PMS2抗體100 ul

雞5羥色/血清素/血清(5HT/ST)ELISA試劑盒PNAT/NAT2  N-乙?；D(zhuǎn)移酶2抗體100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。