公司產(chǎn)品僅用于科研測定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑) 產(chǎn)品名稱:NADH氧化酶(NOX)試劑盒品牌 規(guī)格:48樣、96樣、 貨號:GOY-016604 檢測方法:可見分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:呼吸代謝途徑系列 貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 phospho-P53 (Thr81) 化腫瘤抑制基因P53抗體白介33(IL-33)ELISA試劑盒 phospho-p53BP1(Ser25/29) 化p53結(jié)合1抗體白介32(IL-32)ELISA試劑盒 WIG-1 p53活化基因608單克隆抗體白介31(IL-31)ELISA試劑盒 PAG608 p53活化基因608單克隆抗體白介3(IL-3)ELISA試劑盒 PAG608 p53活化基因608單克隆抗體白介2誘導(dǎo)的T激(ITK)ELISA試劑盒 p58ipk p58ipk抗體白介2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 P63 protein P63 腫瘤抑制基因抗體白介2受體(IL2R)ELISA試劑盒 Phospho-p63 (Ser395) 化P63腫瘤抑制基因抗體白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒 Phospho-p63 (Ser455) 化P63腫瘤抑制基因抗體白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒 Phospho-p63 (Ser160/Ser162) 化P63腫瘤抑制基因抗體白介29(IL-29)ELISA試劑盒 P73 protein P73腫瘤抑制基因抗體白介28B(IL-28B)ELISA試劑盒 Phospho-p73 (Tyr99) 化P73腫瘤抑制基因抗體白介28A(IL-28A/IFN-λ2)ELISA試劑盒 p70 S6 Kinase/P70 Beta1 核糖體S6激抗體白介27(IL-27)ELISA試劑盒 phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) 化核糖體S6激抗體白介26(IL-26)ELISA試劑盒 p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2 核糖體S6激β2抗體白介25(IL-25)ELISA試劑盒10倍PCR*緩沖100次降壓(NT)重組人Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒, 一步法PCR反應(yīng)20次膠質(zhì)纖維性(GFAP)重組人假定LOC677340 ELISA試劑盒, 超白金TAG DNA聚合200 U介B(NMB)重組人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒, 三脫氧核糖核苷(dNTPs)混合2.5或10mM/毫升介U(NMU)重組人(AZT)ELISA試劑盒, 一步法平端PCR反應(yīng)50次顆粒(NRGN)重組小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒, 一步法熒光定量PCR反應(yīng)20次生長因子(NGF)重組小鼠氨(LPA)ELISA試劑盒, 因化特異性PCR擴(kuò)增(MSP)試劑盒60次束(NFASC)重組小鼠白介1(IL-1)ELISA試劑盒, RNA純化試劑專題肽S(NPS)重組大鼠氧化低密度脂抗體(OLAb)ELISA試劑盒, 名稱規(guī)格黏附分子(NCAM)重組大鼠5羥色(5-HT)ELISA試劑盒, 大量總RNA氯化銫純化試劑盒10次纖維網(wǎng)1(NRP1)重組魚促黃體激 全血總RNA純化試劑盒20次型一氧化氮合(NOS1)重組5-羥-DL-色氨 組織總RNA純化試劑盒20次營養(yǎng)因子3(NT3)重組貝萼皂苷元 Bayogenin 細(xì)胞總RNA純化試劑盒20次營養(yǎng)因子4(NT4)重組Na-對磺-L-氨氯 植物總RNA純化試劑盒(低多糖/)20次元特異性烯化(NSE)重組朝藿定C Epimedin C 植物總RNA純化試劑盒(高多糖/)20次元正五聚Ⅱ(NPTX2)重組Fmoc-L-羥脯氨 NADH氧化酶(NOX)試劑盒品牌肉脂轉(zhuǎn)移檢測試劑盒布氏桿菌菌體抗體 肉軟脂基轉(zhuǎn)移1檢測試劑盒化B-Raf抗體 肉軟脂基轉(zhuǎn)移2檢測試劑盒化B-Raf抗體 乳清核糖轉(zhuǎn)移檢測試劑盒多聚合激3化抗體 乳檢測試劑盒癌易感基因1抗體 乳脫氫檢測試劑盒Bcl-2同源拮抗劑抗體 乳脫氫A檢測試劑盒β3腎上腺能受體抗體 乳鐵檢測試劑盒腦鈉/利鈉肽抗體
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