PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
1,6-己二(>98%,BR)Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb7-二乙氨基-甲基

2,二氯氧基乙酸鈉(>98%,BR)FAK (D2R2E) Rabbit mAb2-氯-甲氧基

4(5)-甲基咪唑(>98%,BR)PathScan® Total HER4/ErbB4 Sandwich ELISA Kit2-溴-1-氟-

氯氧基乙酸鈉(>98%,植物激素級)Spry1 (D9V6P) Rabbit mAb2-氟磺酰氯

氫氧化鋁(>98%,BR)IRF-7 (D2A1J) Rabbit mAbN-甲基-L-脯氨

酸銨三水(>98%,BR)PathScan® Phospho-Rb (Ser780) Sandwich ELISA Kit溴-2-三氟酚

碳酸鋇(>99%,BR)TORC2/CRTC2 (5B10) Mouse mAb2-氯-氟芐

甲酰(>98%,BR)S100A4 (D9F9D) Rabbit mAb2,二氨基酚

比布里希猩紅(>90%,BS)Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser240/244) (D68F8) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)溴-N-基咔唑

檸檬酸鈣；檸檬酸鈣四水SARM1 (D2M5I) Rabbit mAb羥基金剛烷

硫酸銫(分子生物學級)Phospho-CDCP1 (Tyr806) Antibody2-羥基-6-甲

銅片PFKFB2 (D5I5F) Rabbit mAb2-甲氧基-5-硝基三氟甲

氯化亞銅(>97%,BR)LKB1 (D60C5F10) Rabbit mAb (IHC Formulad)3,5,3',5'-四甲基-4,4'-二羥基聯(lián)

化亞銅(>99%,BR)LKB1 (D60C5F10) Rabbit mAb (IHC Formulad)N,N-二酸鹽酸鹽

2'-脫氧鳥苷5'二酸二鈉鹽PathScan® Total M-CSF Receptor Sandwich ELISA Kit氮雜環(huán)丁烷-甲酸甲酯鹽酸鹽

D-葡萄糖酸鈉(> 98%，BR)MEK1/2 (D1A5) Rabbit mAb (HRP Conjuga)氨基-2-甲氧基嘧啶

乙二四乙酸二鈉一鈣鹽AKR1C2 Antibody2,二氯-3,5-二酚

聚蔗糖70PDK1 (D4Q4D) Rabbit mAb2,二氯煙酸
百日咳波氏桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒human Fibrinogen  纖維蛋白原抗體100 ul

基質金屬蛋白酶1酶原(Pro-MMP-1)ELISA試劑盒FLASH/CASP8AP2  半胱氨酸蛋白酶8相關蛋白2抗體100 ul

基質金屬蛋白酶14(MMP-14)ELISA試劑盒FLG(filaggrin)  絲聚蛋白/中間絲蛋白抗體100 ul

基質金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒FLIP S/L   凋亡調節(jié)基因之一抗體100 ul

基質金屬蛋白酶12(MMP-12)ELISA試劑盒FLIPS  凋亡調節(jié)基因之一抗體（短型）100 ul

基質金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒FLT-3/CD135  FMS樣酪氨酸激酶3100 ul

基質金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒Phospho-FLT3 (Tyr591)  酸化FMS樣酪氨酸激酶3100 ul

基質γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒Phospho-FLT3 (Tyr589/591)  酸化FMS樣酪氨酸激酶320 ul

基膜聚糖/內腔蛋白(LUM)ELISA試劑盒Phospho-FLT3 (Tyr842)  酸化FMS樣酪氨酸激酶3100 ul