產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:艾美耳球蟲屬通用PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 英文名稱:Eimeria spp.PCR 編號(hào):HE30920-R 類別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 酚紅/苯酚紅/苯酚磺酰酞/苯酚磺酞/3,3-二(對(duì)羥苯基)-3H-2,1-苯并氧硫雜環(huán)戊烷-1,1-二氧化物/酚磺酞/酚酞紅/Phenol red 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定 包裝;5g 苯酚紅鈉鹽/酚紅鈉/溶性酚紅鈉鹽/苯酚磺鈦鈉/Phenol red sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:鑒別 包裝;1g 胭脂紅/蟲紅/洋紅/卡紅/胭脂蟲紅/7-β-D-吡喃葡萄糖基-3,5,6,8-四羥基-1-甲基-9,10-二氧代-蒽-2-羧酸/胭脂蟲粉/洋紅色淀/洋紅酸色淀/Carmine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 包裝;250mg 固紅TR/固紅-萘磺酸TR/快紅/固紅/快紅TR/4-氯-2-甲基重氮苯 1,5-萘二磺酸鹽/鹽酸-4-氯-2-甲/4-氯鄰甲鹽酸鹽/耐曬紅TR鹽/固紅TR重氮鹽/Fast red TR 質(zhì)量規(guī)格:檢查用 包裝;5g 固紅片劑/固紅-萘磺酸TR片劑/快紅片劑/快紅TR片劑/Fast red TR Tablets 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 包裝;100g 固紅RC/固紅RC鹽/耐曬紅RC鹽/Fast red RC salt 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 包裝;25g 固紅GG鹽/堅(jiān)牢紅鹽/對(duì)重氮氟硼酸鹽/對(duì)四氟硼酸重氮鹽/4-硝基重氮苯四氟硼酸鹽/Fast red GG salt 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 包裝;1g 堿性品紅/品紅/鹽基品紅/堿性紫14/玫/深紅色/紅色染料/堿性新品紅/玫瑰鹽酸鹽/(4-(4-氨基苯基)(4-亞氨基環(huán)己-2,5-二烯亞基)甲基)-2-甲基鹽酸鹽/玫瑰色素/4-胺-3-甲苯雙(4-胺苯)甲醇/Fuchsin basic 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 包裝;5g 酸性品紅/復(fù)紅/2-氨基-5-[(4-氨基-3-磺苯基)(4-亞氨基-3-磺基-2,5-環(huán)己二烯-1-亞基)甲基]-3-甲基苯磺酸二鈉鹽/品紅S/酸性紫19/Fuchsin acid 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 包裝;100g 紅四氮唑/2,3,5-三苯基氯化四氮唑/2,3,5-氯化三苯基四氮唑/氯代三苯基四氮唑/四氮唑紅/紅四唑/氯化-2,3,5-三苯基四氮唑/氯化三苯基四氮唑/2,3,5-三苯基-2H-四唑翁氯化物/三苯基氯化四唑/TTC/TPTZ/TTZ/RT 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 包裝;25g 四氮唑紫/四唑紫/2,5-二苯基-3-(1-萘基)-2H-四唑鎓氯化物/2,5-二苯基-3-(1-萘基)-2H-四唑氯化物/TV 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 包裝;5g 四氮唑藍(lán)/四唑藍(lán)/藍(lán)四氮唑/四氮唑蘭/藍(lán)四唑/氯化四唑藍(lán)/氯化藍(lán)四氮唑/3,3'-[3,3'-二甲氧基-1,1'-聯(lián)苯-4,4'-二基]-雙(2,5-二苯基-2H-四唑)氯化物/氯化四氮唑蘭/氯化3,3′-[3,3′-甲氧基-(1,1′-二苯基)-4,4′-diyl]-bis(2.5-二苯基-2H-四氮唑)/四唑蘭/BTC/BT 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 包裝;1g 中性紅/堿性紅5/2-甲基-3-氨基-6-二甲氨基二氮雜蒽鹽酸鹽/3-氨基-6-二甲氨基-2-甲基吩嗪鹽酸鹽/ N8-3-*基-2,8-吩嗪二胺單鹽酸鹽/奎諾二甲基丁烷/3-氨基-7-二甲基氨基-2-甲基吩嗪鹽酸鹽/Neutral red 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 包裝;250mg 甲基紅/甲紅/烷紅/甲烷紅/對(duì)二甲氨基偶氮苯鄰羧酸/酸性紅2/2-[[4-(二甲基氨基)苯基]偶氮基]苯甲酸/MR 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 包裝;25MG 甲基紅鈉/甲基紅鈉鹽/2-[4-(二甲基氨基)苯基偶氮]苯甲酸鈉鹽/溶性甲基紅/對(duì)二甲氨基偶氮苯鄰羧酸鈉/4-二甲氨基偶氮苯-2' -羧酸鈉鹽/Methyl red sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg 剛果紅/直接剛果紅/煮大紅/棉紅/直接朱紅/直接大紅/二苯基-4,4′-二[(偶氮2)-1-氨基萘-4-磺酸鈉]/直接紅28/3,3'-[[1,1'-聯(lián)苯]-4,4'-基雙(偶氮)]雙(4-氨基萘-1-磺酸)二鈉/風(fēng)果紅/直接大紅4B /Congo red 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 包裝;5mg 剛果紅試紙/Congo red test paper 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 包裝;10mg 艾美耳球蟲屬通用PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 Coniochaeta│sp. 中文名稱:錐毛殼屬種屬:Coniochaeta│sp.分離基物:Menegazzia terebrata提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì),抗藤黃八疊球菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:25C存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié);-80℃冰箱凍結(jié) 純度:97% Pannonibacter│phragmitetus 中文名稱:Pannonibacter phragmitetus種屬:Pannonibacter│phragmitetus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:98% Paenibacillus│dauci 中文名稱:Paenibacillus dauci種屬:Paenibacillus│dauci提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:98% Actinokineospora│diospyrosa 中文名稱:Actinokineospora diospyrosa種屬:Actinokineospora│diospyrosa提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:98% Leclercia│adecarboxylata 中文名稱:非脫羧勒克氏菌種屬:Leclercia│adecarboxylata提供形式:凍干物安全等級(jí):2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Streptococcus│hemolytis-MG 中文名稱:MG溶血性鏈球菌種屬:Streptococcus│hemolytis-MG提供形式:凍干物安全等級(jí):3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:教學(xué),科研培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0109生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Streptococcus│sanguis 中文名稱:血液鏈球菌種屬:Streptococcus│sanguis提供形式:凍干物安全等級(jí):3模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0109生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Streptococcus│sp. 中文名稱:鏈球菌種屬:Streptococcus│sp.提供形式:凍干物安全等級(jí):3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:B X培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0109生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98% 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |