保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 產(chǎn)品名稱:腎綜合癥出血熱病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書 英文名稱:Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Virus(HFRSV)RTPCR 編號(hào):HE31069-R 類別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 辣椒素/壬酰-4-羥-3-甲氧基芐胺/壬酰香草胺/N-(4-羥基-3-甲氧基芐基)壬酰胺/壬酸香草酰胺/合成辣椒堿/洛里維德/羥基甲氧基芐基壬酰胺/Nonivamide 包裝;1g 苦參素/氧化苦參堿/Ammothamnine 包裝;25g 2-羰基丁酸鈉鹽/2-氧代丁酸鈉/2-丁酮酸鈉鹽/3-甲基酸鈉鹽/α-丁酮酸鈉鹽/α-酮丁酸鈉/丙酰基甲酸鈉/Sodium 2-oxobutyrate 包裝;5g 凱素靈/(S)α-氰基-苯氧基芐基(1R,3R)-3-(2,2-二溴乙烯基)-2,2-二甲基環(huán)丙烷羧酸酯/α-氰基-3-苯氧基芐基(IRS)順式-3-(2,2-二溴乙烯基)-2,2-二甲基環(huán)丙烷羧酸酯/敵殺死//(S)-alpha-氰基-3-苯氧芐基-(+)-順-3-(2,2,二溴乙烯基)-2,2-二甲基環(huán)丙烷羧酸酯/Deltamethrin 包裝;100g 間羥基聯(lián)苯/3-苯基酚/3-羥基聯(lián)苯/間苯基酚/3-苯基苯酚/3-Phenylphenol 包裝;25g 聚氯乙烯/PVC多元復(fù)合潤(rùn)滑劑/酚醛樹脂清漆/聚氯乙烯樹脂/氯綸短纖維/氯乙烯的均聚物/PVC樹脂/PVC乳液/PVC 包裝;500g 鞘磷脂/鞘磷酯/神經(jīng)鞘磷脂/Sphingomyelin 包裝;10mg N-乙?;?4-哌啶酮/N-乙酰-4-哌啶酮/1-乙酰-4-哌啶酮/1-乙?;?4-哌啶酮/4-乙?;哙ね?N-Acetyl-4-piperidone 包裝;100g 2-甲基雷鎖辛/2,6-二羥基甲苯/2-甲基間苯二酚/2-甲基雷瑣辛/2-甲基間苯二酚醇/2-甲基-1,3-苯二酚/二甲基間苯二酚/2-Methylresorcinol 包裝;25g 四乙二醇/α-[(四氫-2-呋喃)甲基]-W-羥基聚(氧-1,2-乙二基)/糖原質(zhì)/四乙二醇醚/乙氧基化四氫糠醇/Tetraglycol 包裝;5g 玉米赤霉酮/4,4-二羥基-6-[10 -羥基- 6 -羰基十一烷基]苯甲酸內(nèi)酯/Zearalanone 包裝;100g 瓜萎鐮菌醇/雪腐鐮刀烯醇/NIV 包裝;25g 3-溴丙胺溴化氫/3-溴丙胺鹽/3-溴丙基胺鹽/3-Bromopropylamine hydrobromide 包裝;5g 2,3-二羥基苯甲酸/焦兒茶酸/2,3-二羥苯甲酸/兒茶酚甲酸/2,3-二苯甲酸/茶酚甲酸/2,3-Dihydroxybenzoic acid 包裝;1g N,N-二乙基對(duì)苯二胺/4-二乙氨基/對(duì)氨基-N,N-二乙/N,N-二乙基-1,4-苯二胺/對(duì)氨基-N,N-二乙基/二乙基-N,N-對(duì)苯二胺/4-Amino-N,N-diethylaniline 包裝;25g 間羥基/3-羥基/3-羥基苯基乙酸/3-Hydroxyphenylacetic acid 包裝;5g 2-羥基/鄰羥基/鄰羥基苯醋酸/2-羥基苯醋酸/2-(2-羥基苯基)乙酸/2-Hydroxyphenylacetic acid 包裝;1g 腎綜合癥出血熱病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書Nectria│sp. 中文名稱:叢赤殼種屬:Nectria│sp.分離基物:樣/下層海提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋絲狀真菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:475生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:65% Alternaria│sp. 中文名稱:鏈格孢霉種屬:Alternaria│sp.分離基物:生物樣/阿吉木-根提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海絲狀真菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:98% Corynespora│cassiicola 中文名稱:山扁豆生棒孢種屬:Corynespora│cassiicola分離基物:生物樣/秋茄-枝提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海絲狀真菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:98% Fusarium│avenaceum 中文名稱:燕麥鐮孢種屬:Fusarium│avenaceum分離基物:生物樣/長(zhǎng)梗肖瑾-皮提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海絲狀真菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:97% Colletotrichum│truncatum 中文名稱:平截刺盤孢菌種屬:Colletotrichum│truncatum分離基物:生物樣/刺桐-皮提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海絲狀真菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:97% Cytospora│sp. 中文名稱:殼囊孢種屬:Cytospora│sp.分離基物:生物樣/海桑-果提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海絲狀真菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:97% Talaromyces│flavus 中文名稱:黃籃狀菌種屬:Talaromyces│flavus分離基物:生物樣/紅樹林泥提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海絲狀真菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:97% Cytospora│brevispora 中文名稱:殼囊孢霉(加詞待譯)種屬:Cytospora│brevispora分離基物:生物樣/海桑-根提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海絲狀真菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:97% |