實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 產(chǎn)品名稱 | 嗜衣原體通用PCR檢測試劑盒說明書 | 英文名稱 | Chlamydophila spp. PCR | 貨號 | HE30809-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點(diǎn)優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 6,7-二甲氧基-4-甲基DIMETHOXY-4-METHYLCOUMARIN,6,7-(RG) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg 4',7-二甲氧基異黃酮 DIMETHOXYISOFLAVONE,4',7-(RG) 質(zhì)量規(guī)格:BS 包裝;1g 薯蕷皂素 DIOSGENIN(SAPOGENIN)(AS) 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;5g 薯蕷皂甙 DIOSCIN(P) 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;25ml 薯蕷皂甙 DIOSCIN(P) 質(zhì)量規(guī)格:>99% 包裝;5ml 薯蕷皂甙 DIOSCIN(P) 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;25g 薯蕷皂甙 DIOSCIN(P) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;5g 薯蕷皂甙 DIOSCIN(RG)(REQUEST QUOTE) 質(zhì)量規(guī)格:>97% 包裝;100ml 薯蕷皂甙 DIOSCIN(RG) 質(zhì)量規(guī)格:AR 包裝;1g DIFORMYLBENZOYLADENOSINE, 3,4-(P)(PLEASE CALL) 質(zhì)量規(guī)格:>96% 包裝;1g L-(+)-二甲酯 DIMETHYL-L-TARTRATE, (+)-(RG) 質(zhì)量規(guī)格:AR,99% 包裝;5g 4,4-二甲基-2-戊酮 DIMETHYL-2-PENTANONE, 4,4-(P) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g 3,4-二甲氧基肉桂酸 DIMETHYLCAFFEIC ACID(P) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 1,3-二甲基戊胺鹽酸鹽 DIMETHYLPENTYLAMINE HCL, 1,3-(P) 質(zhì)量規(guī)格:AR,99% 包裝;5g 1,3-二甲基戊胺鹽酸鹽 DIMETHYLPENTYLAMINE HCL, 1,3-(P) 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;1ml 3,5-二甲酸 DINITROBENZOIC ACID,3,5-(RG) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,BR 包裝;25ml 甲基傘形酮 DIMETHYLUMBELLIFERONE,3,4-(RG) 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;5ml 嗜衣原體通用PCR檢測試劑盒說明書Ochrocladosporium│frigidarii Crous & U. Braun 中文名稱:須殼孢種屬:Ochrocladosporium│frigidarii Crous & U. Braun分離基物:枝干提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97% Phyllosticta│theaefolia Hara 中文名稱:茶葉葉點(diǎn)霉種屬:Phyllosticta│theaefolia Hara分離基物:茶樹葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:26存儲條件:定期移植法 純度:>98.0%(GC) Myrothecium│roridum Tode 中文名稱:露濕粘座孢霉(或露濕漆斑菌)種屬:Myrothecium│roridum Tode分離基物:洋玉蘭落葉葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:26存儲條件:定期移植法 純度:>98.0%(GC) Mucor│circinelloides f. circinelloides Tiegh. 中文名稱:爪哇毛霉種屬:Mucor│circinelloides f. circinelloides Tiegh.分離基物:洋玉蘭落葉葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:26存儲條件:定期移植法 純度:98% Monographella│cucumerina (Lindf.) Arx 中文名稱:煙草鐮刀菌種屬:Monographella│cucumerina (Lindf.) Arx分離基物:麥冬葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:26存儲條件:定期移植法 純度:98% Kendrickomyces│indicus B. Sutton V.G. Rao & Mhaskar 中文名稱:印度肯德座霉種屬:Kendrickomyces│indicus B. Sutton V.G. Rao & Mhaskar分離基物:迎春花葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:26存儲條件:定期移植法 純度:≥90% (HPLC) Glomerella│graminicola D.J. Politis 中文名稱:禾谷種屬:Glomerella│graminicola D.J. Politis分離基物:麥冬葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:26存儲條件:定期移植法 純度:98% Gibberella│intricans Wollenw. 中文名稱:木賊鐮刀菌種屬:Gibberella│intricans Wollenw.分離基物:早熟禾葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:26存儲條件:定期移植法 純度:98% |