【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱 | NADH含量 | 檢測(cè)方法 | 微量法 | 貨號(hào) | YSRIBIO-S3211 |
試劑使用須知: (1)請(qǐng)參照相關(guān)法規(guī)、文獻(xiàn)、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進(jìn)行安全操作。 (2)通常購(gòu)買(mǎi)試劑時(shí)一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。 (3)萬(wàn)一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員。必須在專業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進(jìn)行操作。對(duì)于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理。 (4)購(gòu)買(mǎi)后,請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng);做好預(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng),做好必要的安全對(duì)策;對(duì)沒(méi)有標(biāo)明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進(jìn)行操作;必須帶好防護(hù)用具,小心翼翼進(jìn)行操作。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。 2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。 3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。 4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。 5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。 6、回收試驗(yàn): X =103.3%。 7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。 8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。 取用規(guī)則 固體粉末試劑可用潔凈的牛角勺取用。要取一定量的固體時(shí),可把固體放在紙上或表面皿上在臺(tái)秤上稱量。要準(zhǔn)確稱量時(shí),則用稱量瓶在天平上進(jìn)行稱量。液體試劑常用量筒量取,量筒的容量為:5mL、10mL、50mL、500mL等數(shù)種,使用時(shí)要把量取的液體注入量筒中,使視線與量筒內(nèi)液體凹面的zui低處保持水平,然后讀出量筒上的刻度,即得液體的體積。 如需少量液體試劑則可用滴管取用,取用時(shí)應(yīng)注意不要將滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。 為了達(dá)到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,取用試劑時(shí)應(yīng)遵守以下規(guī)則,以保證試劑不受污染和不變質(zhì): (1)試劑不能與手接觸。 (2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,絕對(duì)不準(zhǔn)用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。 (3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處。 (4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶?jī)?nèi)。 另外取用試劑時(shí)應(yīng)本著節(jié)約精神,盡可能少用,這樣既便于操作和仔細(xì)觀察現(xiàn)象,又能得到較好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 犬堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒 bFGF basic fibroblast growth factor 3.125pg/ml100pg/ml 0.1 犬MDCK細(xì)胞宿主蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒 MDCKCHP MDCK Cellular host protein 0.3125ng/ml10ng/ml 0.1 犬包蟲(chóng)病ELISA檢測(cè)試劑盒 HD hydatid disease 0 10 犬結(jié)核病ELISA檢測(cè)試劑盒 TB tuberculosis 0 10 犬抗核抗體ELISA檢測(cè)試劑盒 ANA Anti-nuclear Antibody 25ng/ml800ng/ml 1 犬ELISA檢測(cè)試劑盒 Cortisone Cortisone 0 10 螃蟹腫瘤壞死因子αELISA檢測(cè)試劑盒 TNF-α Tumor necrosis factorα 10pg/mL320pg/mL 1 犬胰島素樣生長(zhǎng)因子1ELISA檢測(cè)試劑盒 IGF-1 Insulin-like growth factor 1 2nmol/L64nmol/L 0.1 犬胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA檢測(cè)試劑盒 CA199 Gastrointestinalcancer Marker-CA199 3.125U/ml100U/ml 0.1 犬組織多肽抗原ELISA檢測(cè)試劑盒 TPA Tissue Polypeptide Antigen 3.75U/L120U/L 0.1 犬絨毛膜促性腺激素ELISA檢測(cè)試劑盒 HCG Chorionic Gonadotrophin 3.75mIU/mL120mIU/mL 0.1 犬甲胎蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒 AFP Alpha-fetoprotein 2.5ng/mL80ng/mL 0.1 犬血清鐵蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒 SF Serum ferritin 6.25ng/mL200ng/mL 1 犬成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子7ELISA檢測(cè)試劑盒 FGF-7 fibroblast growth factor-7 25pg/ml800pg/ml 1 犬類胰蛋白酶ELISA檢測(cè)試劑盒 TPS Trypsin 0.5ng/ml16ng/ml 0.1 犬前列腺特異性抗原ELISA檢測(cè)試劑盒 PSA prostate specific antigen 100pg/ml3200pg/ml 10 AsPC-1(人胰腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 AtT-20(小鼠垂體瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Bcap-37(人乳腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BEL-7402(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BEL-7404(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BGC823(人胃癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BHK-21(倉(cāng)鼠腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BRL(大鼠肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BSC-1(猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BT-474(人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BT-549(人乳腺管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BxPC-3(人原位胰腺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 C127(小鼠乳腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 C2C12(小鼠成肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 C-33 A(人子宮頸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 C4-2(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 C6(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Ca Ski(人宮頸癌上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CA46(人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Caco-2(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CaES-17(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Caki-1(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Calu-1(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Calu-3(人肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Caov-3(人乳突狀卵巢腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CCD-1095Sk(人乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CCL-149(大鼠肺泡上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NADH含量CHL(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CHO(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CHO-K1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株) 5×106cells/瓶×2 CNE(人鼻咽癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 操作步驟(僅供參考): 1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測(cè)定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準(zhǔn)備樣品: a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。 b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測(cè)定,尿液通常也可以直接用于測(cè)定,-70℃凍存,用于CAT的檢測(cè)。 c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測(cè)。 d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。 e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。 f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。 3、 CAT檢測(cè):按照下表設(shè)置空白管、自身對(duì)照管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)能設(shè)置平行孔。 4、分光光度計(jì)檢測(cè)405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測(cè),但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測(cè)。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。
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