實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | 鯉皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格 ? | 英文名稱 | Cyprinid Herpesvirus(CyHV)PCR | 貨號(hào) | HE30876-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。 8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點(diǎn)優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 對(duì)-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷/4--N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷/4-基-2-乙酰胺基-2-脫氧-β-D-吡喃葡糖苷/4--N-乙酰-β-D-葡糖胺/4-基-2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖苷/PNP-Nag 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 對(duì)-N-乙酰-α-D-氨基葡萄糖苷/4--N-乙酰-α-D-氨基葡萄糖苷/4-基-2-乙酰胺基-2-脫氧-α-D-吡喃葡糖苷/4-基-2-乙酰氨基-2-脫氧-α-D-吡喃葡萄糖苷/4-Nitrophenyl-N-acetyl-α-D-glucopyranoside/GlcNAc1-α-PNP 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 對(duì)-N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷/4--N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷/4-基-N-乙酰-β-D-半乳胺/4-基-2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃半乳糖苷/4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-galactosaminide/GalNAc1-β-PNP 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;250mg 穩(wěn)定劑SHE-50/Stability HE50 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 復(fù)合酶穩(wěn)定劑AES/Enzyme Stabilizer AES 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100ml 肽酶/肽鏈端解酶/外肽酶/蛋白酶/蛋白解酶/Peptidase 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;500ml 谷胱甘肽還原酶/GR/Glutathione Reductase from baker's yeast 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100g 谷胱甘肽過氧化物酶/GPX/GSH-Px 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 包裝;25g 風(fēng)味酶/風(fēng)味蛋白酶/Flavourzyme 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;500g 堿性蛋白酶/Alkaline proteinase 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 復(fù)合蛋白酶/復(fù)合酶/Compound proteinase 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶/谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶/轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶/TG 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 碳酸酐酶(牛紅血球)/碳酸脫酶(牛紅血球)/Carbonic anhydrase(Bovine erythrocytes) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;100g 羧肽酶A(牛胰)/Carboxypeptidase A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品,吳茱萸提取 包裝;25g 羧肽酶B(豬胰)/精蛋白酶/肽酰-L-賴氨酸解酶/肽酰-L-精氨酸解酶/Carboxypeptidase B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品,橙皮提取 包裝;100mg 羧肽酶Y(酵母)/Carboxypeptidase Y(Yeast) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,橙皮提取 包裝;50mg 丁酰膽堿酯酶/BCHE/BUCHE 質(zhì)量規(guī)格:含量50%,藥用級(jí) 包裝;100mg 鯉皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒規(guī)格 Gluconacetobacter│hansenii 中文名稱:漢氏葡糖酸醋桿菌種屬:Gluconacetobacter│hansenii提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:produces 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase produces 3-hydroxysteroid dehydrogenase 3-beta-hydroxysteroid dehydrogenase培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:26℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:99% Lactobacillus│rossiae 中文名稱:羅氏乳桿菌種屬:Lactobacillus│rossiae提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:Type strain培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98% Aeromonas│punctata subsp. caviae 中文名稱:斑點(diǎn)氣單胞菌豚鼠亞種種屬:Aeromonas│punctata subsp. caviae提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:培養(yǎng)基:KNO3 2g;MgSO4.7H2PO 2g;K2HPO4 0.5g;鉀鈉 20g;瓊脂 20g培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:441存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Micromonospora│peucetia 中文名稱:阿普利亞小單孢菌種屬:Micromonospora│peucetia提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:培養(yǎng)基:NH4Cl 0.535g;KH2PO4 0.054g;KCl 0.074g;MgSO4.7H2O 0.049g;CaCl2.2H2O 0.147g;NaCl 0.584g;0.05%甲酚紅溶液 1ml;微量元素液 1ml;PH7.0-8.0,適7.8,用0.5gCaCO3或11.9gHEPES調(diào);瓊脂 20g培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:A4生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Aquaspirillum│arcticum 中文名稱:北極螺菌種屬:Aquaspirillum│arcticum提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:R2A生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Sphingomonas│melonis 中文名稱:瓜類鞘氨醇單胞菌種屬:Sphingomonas│melonis提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:R2A生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Leptothrix│discophora 中文名稱:盤狀纖發(fā)菌種屬:Leptothrix│discophora提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:R2A生長條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:97% Bacillus│thuringiensis subsp. galleriae 中文名稱:蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種種屬:Bacillus│thuringiensis subsp. galleriae提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30-32℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:97% |