特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產(chǎn)品名稱 | 豬肺炎支原體探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Mycoplasma hyopneumoniae | 貨號 | YSP96977 |
熒光染料的優(yōu)點: 產(chǎn)品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合; 價格便宜; 熒光染料的缺點: 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會影響檢測的敏感性 非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。 正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。 當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。 TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。 TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點: 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術(shù)的缺點: 成本高; 設(shè)計難度大; 只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術(shù)的定量原理: 擴增曲線 在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。 在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。 PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。 一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 雞轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA Kit 進口/分裝 家蠶卵黃蛋) ELISA試劑盒英文名稱:Bombyx mori Live ELISA Kit* 荊豆凝集素(UEA)ELISA試劑盒 英文名稱:Ulex Europaeus agglutinin,UEA ELISA Kit進口/分裝 規(guī)格:5*96孔口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA試劑盒英文名稱:Elisa* 規(guī)格:5*96孔藍耳病ELISA試劑盒英文名稱:Elisa* HPV16-E6/E6 protein(Human papillomavirus type 16) 人類狀瘤病毒16抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg Anti-ABCB5 ATP結(jié)合蛋白家族5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml C12ORF50 英文名稱: 12號染色體開放閱讀框50抗體 0.2ml Anti-Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1345) 酸化胰島素受體β抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml SP-B(Human Pulmonary surfatcant-associated protein B) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白BMulti-class antibodies規(guī)格: 48T Anti-HPV16 E6 + HPV18 E6 人類狀瘤病毒16/18 E6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml Rhesus antibody Rh MCC 大腸癌突變蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml ICE(Human Interleukin 1 Beta converting enzyme) ELISA Kit 人白介素1β轉(zhuǎn)換酶 96T RNF70 英文名稱: 環(huán)指蛋白70抗體 0.2ml 熱休克蛋白70 單克隆抗體HSP70 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 半乳糖凝集素-3 單克隆抗體Galectin-3 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 表皮生長因子受體 單克隆抗體EGFR Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 人類表皮生長因子受體2 單克隆抗體HER2 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul CD45 單克隆抗體CD45 Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul α甲基?;o酶A消旋酶 單克隆抗體AMACR Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul 豬肺炎支原體探針法熒光PCR檢測試劑盒cGMP依賴性蛋白激酶2抗體STAT1/FITC 熒光素標記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體IgG25 ug 結(jié)蛋白樣蛋白CGNL1抗體phospho-STAT1 (Ser727) /FITC 熒光素標記酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體IgG25 ug 細胞生長調(diào)節(jié)蛋白CGREF1抗體STAT2/FITC 熒光素標記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2(STAT2)抗體IgG100 ul 富含亮氨酸軟骨蛋白抗體Phospho-Stat2 (Tyr690)/FITC 熒光素標記酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體IgG100 ul 軟骨蛋白樣蛋白抗體STAT3 /FITC 熒光素標記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體IgG100µl 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD3抗體phospho-STAT3 (Ser727) /FITC 熒光素標記酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體IgG100 ul 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD10抗體STAT4 /FITC 熒光素標記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體IgG100 ul 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD7抗體Phospho-Stat4 (Tyr693) /FITC 熒光素標記酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體IgG100 ul ATP依賴的解旋酶CHD1抗體STAT5/FITC 熒光素標記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗體IgG20 ul |