PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
氯化乙酰膽(標準品)Anti-Blue (2D2F11) Mouse mAb (HRP Conjuga)替莫唑

氯化乙酰膽TrkA and TrkB Antibody Sampler Kit芴甲氧羰基-L-天冬氨酸 芐酯

alpha-亞麻酸(標準品)YY1 (D5D9Z) Rabbit mAb羥基吡咯烷鹽酸鹽

MQAE(氯離子熒光探針)KSR1 Antibody(S)-(+)-羥基四

特立氟SimpleChIP® Human Oct-4 Promor Primers(R)-(-)-羥基四

當歸?；昝仔罤(標準品)AIF Antibody頭孢他啶側(cè)鏈酸

美曲勃龍(R-1881)Rab5 (E6N8S) Mouse mAb達沙替尼

克羅米通α-Smooth Muscle Actin (1A4) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)氟康唑

(+)松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準品)HSP70 (D1M6J) Mouse mAb7-氯-6-氟-1-環(huán)基-1,二氫-氧-喹啉羧酸

氯磺隆Autophagy Induction (ULK1 Complex) Antibody Sampler Kit2,二氯-5-氟甲酰氯

L-墨蝶呤DHX29 (G63) Antibody2-氯噻噸酮

鄰氟乙酮SimpleChIP® Human Sox2 Promor Primers2,6-二氯-三氟肼

莫特塞尼Vinculin Antibody2-氯-(三氟甲基)肼

金松雙黃酮(標準品)Vinculin Antibody椰油酰基甜菜

10-羥基癸酸,10-HDA(標準品)Rac1/Cdc42 Antibody2,二甲氧基甲

艾力替尼甲磺酸鹽(AST1306)Rac1/Cdc42 Antibody甲

拉羅皮蘭,MK0524PTMScan® Phospho-MAPK/CDK Substra Motif (PXS*P and S*PXK/R) Kit8-喹啉甲酸

鹽酸頭孢噻呋FastScan™ Phospho-IκBα (Ser32) ELISA Kit(甲基哌)甲酸
馬皰疹病毒1型探針法熒光PCR檢測試劑盒魚胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒phospho-Akt/FITC  熒光素標記抗酸化蛋白激酶B抗體IgG100 ul

魚胰島素受體α亞基(ISR-α)ELISA試劑盒CEA/Gold  膠體金標記癌胚抗原抗體IgG100 ul

魚胰島素受體(ISR)ELISA試劑盒Aldolase A/FITC  熒光素標記縮酶A抗體IgG300 ul

魚胰島素(INS)ELISA試劑盒ALK/CD246Ag /FITC  熒光素標記間變型淋巴瘤激酶抗體IgG100 ul

魚血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒phospho-ALK/CD246(Tyr1586) /FITC  熒光素標記兔抗、酸化間變型淋巴瘤激酶抗體IgG100 ul

魚雄二酮(ASD)ELISA試劑盒ALK/CD246(phospho Tyr1278/1282/1283) /FITC  熒光素標記兔抗、大、間變型淋巴瘤激酶抗體IgG20 ul

魚細胞色素C氧化酶(COX)ELISA試劑盒ALK/CD246(phospho Tyr1604) /FITC  熒光素標記兔抗、大、間變型淋巴瘤激酶抗體IgG100 ul

魚脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒ALR/FITC  熒光素標記肝再生增強因子抗體IgG100 ul

魚褪黑素(MT)ELISA試劑盒ALT1/GPT 1/FITC  熒光素標記谷丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶1抗體IgG100 ul