樣品RNA的抽提：
①產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質(zhì)量檢測(cè)
1）紫外吸收法測(cè)定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測(cè)定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計(jì)算公式為：A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。

實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
基-2-乙酰氨基-2-脫氧-b-D-葡萄糖苷(>99%,BC)Phospho-4E-BP1 (Thr70) (D7F6I) Rabbit mAb十二烷基

-Α-L-吡喃海藻糖苷(>98%,BC)Phospho-p90RSK (Ser380) (D5D8) Rabbit mAb (PE Conjuga)2-溴-3,3,三氟

基-beta-D-葡萄糖酸苷(>98%,BC)KHSRP (E2E2U) Rabbit mAb1-溴-氟-5-

肼(>98%,BC)Nogo-A Antibody2,8-二氯喹啉-甲

酮(>98%,BR)CD9 (D3H4P) Rabbit mAb紫蘇

無毒型核酸染色劑Phospho-Rad17 (Ser635) (D6K9P) Rabbit mAb1H-吲唑-6-羧酸

5,5-二甲基-1,環(huán)己二酮Enolase-1 (D2S1A) Rabbit mAbN,N'-二(2-氨乙基)-1,二

5-氟胞苷(>98%,BR)GATA-3 (D13C9) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)2-氨甲基-(氟芐基)嗎啉

駢三氮唑(>98%,BR)SimpleChIP® Human NR1D1 Promor Primers5-二并環(huán)庚酮

5-甲基吲哚(>98%,BR)Munc18-1 (D4O6V) Rabbit mAb1-氯-2-三氟甲氧基

5-硝基愈創(chuàng)木酚(植物激素級(jí))CNOT6 (E1L8F) Rabbit mAb二(乙酰酮基)鈦酸二異酯

6-溴-2-萘酚(>98%,BR)PTMScan® Acetyl-Lysine Motif [Ac-K] Kit9,9-二甲基氧雜蒽

6-(γ,γ-二甲基基氨基)嘌呤核苷(植物激素級(jí))Rev-Erbα (E1Y6D) Rabbit mAb(S)-N-芐氧羰基-氨基-基-1-

6-甲基(>98%，BR)E-Tag Antibody2-甲基吡咯烷

7-氨基頭孢烷酸SSRP1 (E1Y8D) Rabbit mAb1-BOC-羥甲基哌

8-羥基喹哪啶(>98%,BR)Choline Kinase α (D5X9W) Rabbit mAb氨基甲酸甲酯

9,10-二溴蒽(>98%,BR)PHGDH Antibody甲?；胚崴?1-羧酸 T-丁基酯

雙酚芴(>98%,BR)Focal Adhesion Proin Antibody Sampler Kit3，5-吡唑二甲酸
牛皰疹病毒通用探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒骨橋素(OPN)ELISA試劑盒GFR Alpha-1  GDNF家族受體α-1抗體100 ul

骨膜蛋白/成骨細(xì)胞特異性因子2(POSTN)ELISA試劑盒GHR  生長(zhǎng)激素受體抗體100 ul

骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒Ghrelin  腦腸肽抗體20 ul

骨性酸酶(BALP)ELISA試劑盒GHRF/GHRH  生長(zhǎng)激素釋放激素抗體100 ul

骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒ID1  DNA結(jié)合抑制因子1抗體100 ul

骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒GIG8/ID2  DNA結(jié)合抑制因子2抗體500 ul

骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒GIP  胃泌素抑制肽抗體100 ul

骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒TNFRSF18  糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗體100 ul

骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒Glasses Snake poison Proin  兔抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體（眼鏡蛇）100 ul