公司產(chǎn)品僅用于科研測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。 2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 產(chǎn)品名稱:丙酮酸激酶(PK)試劑盒說(shuō)明書(shū) 規(guī)格:48樣、96樣、 貨號(hào):GOY-016613 檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類(lèi):呼吸代謝途徑系列 貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 少孢酵母全組織馮庫(kù)薩(VON KOSSA)鈣染色試劑盒人腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)試劑盒 *雞油菌都不能訂購(gòu)石蠟切片茜紅(ALIZARIN RED S)鈣染色試劑盒人色上皮衍生因子(PEDF)試劑盒 突臍蠕孢菌冰凍切片茜紅(ALIZARIN RED S)鈣染色試劑盒人克拉拉(CC16) 試劑盒 雀黃鏈霉菌細(xì)胞茜紅(ALIZARIN RED S)鈣染色試劑盒人黑色抗體(MC Ab)試劑盒 鏈格孢全組織茜紅(ALIZARIN RED S)鈣染色試劑盒人周期D3(Cyclin-D3)試劑盒 克魯斯假絲酵母石蠟切片摩羅利(MALLORY/PERLS)鐵(三價(jià))染色試劑盒人周期D2(Cyclin-D2) 楊齒白木層孔菌冰凍切片摩羅利(MALLORY/PERLS)鐵(三價(jià))染色試劑盒人周期D1(Cyclin-D1)試劑盒 大腸桿菌細(xì)胞摩羅利(MALLORY/PERLS)鐵(三價(jià))染色試劑盒人微量轉(zhuǎn)鐵(MTF)試劑盒 淡紫擬青霉石蠟切片特恩布爾(TURNBULL)鐵(二價(jià))染色試劑盒人鱗狀上皮癌抗原2(SCCAg-2)試劑盒 菜豆間座殼冰凍切片特恩布爾(TURNBULL)鐵(二價(jià))染色試劑盒人癌胚抗原(CEA/CD66)試劑盒 擬粉紅鎖擲孢酵母細(xì)胞特恩布爾(TURNBULL)鐵(二價(jià))染色試劑盒人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)D(SP-D)試劑盒 斯氏梭菌石蠟切片皮爾斯(PERLS-DAB)非血紅鐵(三價(jià))人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)C(SP-C)試劑盒 阿舒假囊酵母強(qiáng)化染色試劑盒人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)B(SP-B)試劑盒 釀酒酵母冰凍切片皮爾斯(PERLS-DAB)非血紅鐵(三價(jià))人肺炎支原體抗體(MP-Ab) Ki 豬鏈球菌強(qiáng)化染色試劑盒人肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)試劑盒 枯草芽胞桿菌細(xì)胞皮爾斯(PERLS-DAB)非血紅鐵(三價(jià))人肺耐藥(LRP)試劑盒 節(jié)狀鐮孢強(qiáng)化染色試劑盒人α1抗胰糜(AACT)試劑盒 直絲淡紫灰鏈霉菌石蠟切片特恩布爾(TURNBULL-DAB)非血紅鐵(二價(jià))強(qiáng)化染色試劑盒人幽門(mén)螺桿菌相關(guān)基因A-IgG(HP-CagA-IgG)試劑盒 慢生根瘤菌冰凍切片特恩布爾(TURNBULL-DAB)非血紅鐵(二價(jià))強(qiáng)化染色試劑盒人粘/粘液7(MUC7)試劑盒 樟疫霉細(xì)胞特恩布爾(TURNBULL-DAB)非血紅鐵(二價(jià))強(qiáng)化染色試劑盒人粘/粘液5AC(MUC5AC)試劑盒 丙酮酸激酶(PK)試劑盒說(shuō)明書(shū)色C氧化檢測(cè)試劑盒白介26抗體 半胱氨合成檢測(cè)試劑盒白介-17D抗體 肌加氧檢測(cè)試劑盒環(huán)指217抗體 肌加氧檢測(cè)試劑盒白介2抗體(人) 檢測(cè)試劑盒白介-23受體抗體 β-伴球檢測(cè)試劑盒胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合3抗體 伴球檢測(cè)試劑盒白介6受體β抗體IL-6Rβ 水蘇糖檢測(cè)試劑盒干擾-gamma受體1抗體
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