產(chǎn)品名稱：NADP蘋果酸酶(NADP-ME)試劑盒規(guī)格

規(guī)格：48樣、96樣、

貨號(hào)：GOY-016631

檢測(cè)方法：可見分光光度法、微板法

產(chǎn)品分類：呼吸代謝途徑系列

公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質(zhì)期：6個(gè)月

【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù)

溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

儀        器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b

置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl

試            劑:乙腈、中性氧化鋁

測(cè)定步驟：

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。

3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。

5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

暗蓋淡鵝膏菌酵母V型ATP（V type ATPase ）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒小鼠白介1(IL-1)試劑盒

巨大芽胞桿菌植物V型ATP（V type ATPase ）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒小鼠白介1β (IL-1β)試劑盒

耐久腸球菌動(dòng)物細(xì)胞線粒體F型ATP（F type ATPase）活性比色法小鼠肌紅(MYO/MB)試劑盒

塔賓曲霉定量檢測(cè)試劑盒小鼠血栓B2(TXB2)試劑盒

分枝節(jié)桿菌動(dòng)物組織線粒體F型ATP（F type ATPase）活性比色法小鼠乙(ACH)試劑盒

淺天青鏈霉菌定量檢測(cè)試劑盒小鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒

Sporosarcina植物葉綠體F型ATP（F type ATPase）活性比色法小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒

盤長(zhǎng)孢狀盤孢定量檢測(cè)試劑盒大鼠活化A受體抗體(ACV-RAb)試劑盒

淺白隱球酵母細(xì)菌F型ATP（F type ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠腦紅(NGB)試劑盒

豌豆根瘤菌酵母F型ATP（F type ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠血小板生成(TPO)試劑盒

棉阿舒囊霉A型ATP（A type ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)試劑盒

Lactobacillus brevis動(dòng)物細(xì)胞總ATP（total ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠Bcl-2相關(guān)X(BAX)試劑盒

檸檬色短小桿菌動(dòng)物組織總ATP（total ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠甘露糖結(jié)合/甘露糖結(jié)合凝集(MBP/MBL)試劑盒

游動(dòng)放線菌*細(xì)菌總ATP（total ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介7(IL-7)試劑盒

格氏嗜鹽堿桿菌酵母總ATP（total ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠絲氨/蘇氨(STK)試劑盒

大腸埃希菌植物總ATP（total ATPase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒大鼠抗紅抗體(RBC)試劑盒

中慢生華癸根瘤菌甲羥戊（MEVALONATE）通路分析試劑專題大鼠CD3分子(CD3)試劑盒

黃桿菌名稱大鼠c-Jun氨基末端激(JNK)試劑盒

黑木耳通用性甲羥戊（mevalonate）含量高效液相層析-質(zhì)譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠高鐵血紅(MHB)試劑盒

大孢枝孢菌細(xì)胞甲羥戊（mevalonate）含量高效液相層析-質(zhì)譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠二氧化(DAO)試劑盒
NADP蘋果酸酶(NADP-ME)試劑盒規(guī)格生物羧化檢測(cè)試劑盒組乙轉(zhuǎn)移PCAF抗體

轉(zhuǎn)羧基檢測(cè)試劑盒化原癌基因c-kit抗體

β--ACP合II檢測(cè)試劑盒化原癌基因c-kit抗體

β--ACP合I檢測(cè)試劑盒離子通道Kv3.1抗體

葡萄糖內(nèi)酯檢測(cè)試劑盒激肽釋放11抗體

羧基轉(zhuǎn)移β亞基檢測(cè)試劑盒k輕鏈抗體

脂檢測(cè)試劑盒絲氨/蘇氨激KIST抗體（激相互作用與白血病相關(guān)基因）

β甘露聚糖檢測(cè)試劑盒驅(qū)動(dòng)KIF5A抗體

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。