產(chǎn)品名稱：羧酸酯酶(CarE)試劑盒規(guī)格

規(guī)格：48樣、96樣、

貨號(hào)：GOY-016667

檢測(cè)方法：可見(jiàn)分光光度法、微板法

產(chǎn)品分類：脂肪酸系列

公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度：2～8℃。

本試劑盒保質(zhì)期：6個(gè)月

【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】

配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù)

溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。

配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19

稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量

配制洗滌液。

配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份

濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

【所用儀器、試劑】

儀        器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b

置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl

試            劑:乙腈、中性氧化鋁

測(cè)定步驟：

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋：將試劑三用蒸餾水稀釋50倍，用多少配多少。（試劑三和蒸餾水1：49稀釋。

3、 工作液配制：在試劑一加入100μl試劑二，充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。（若一次性測(cè)定樣本較少，可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml：0.1ml的比例混勻配制）

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解（溶解后一周內(nèi)用完）。

5、 樣本測(cè)定（在96孔板中依次加入下列試劑）

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

擬卵蓋鵝膏菌細(xì)胞花生四烯（arachidonic acid）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介15(IL-15)試劑盒

釀酒酵母組織花生四烯（arachidonic acid）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介16(IL-16)試劑盒

芽孢桿菌白三烯A4（Leukotriene A4 ；LTA4）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介17(IL-17)試劑盒

大腸埃希氏桿菌白三烯B4（LTB4）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒

葉生布勒擔(dān)子酵母白三烯C4（LTC4）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠可溶性E選擇(sE-selectin)試劑盒

枯草芽孢桿菌白三烯D4（LTD4）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)試劑盒

Ensifer adhaerens白三烯E4（LTE4）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)試劑盒

枯草芽孢桿菌5-羥基二十四烯（5-HETE）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠N-乙-β-D-氨基葡萄糖苷(NAG)試劑盒

唐菖蒲伯克霍爾德氏菌12-羥基二十四烯（12-HETE）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠17-類固(17-KS)試劑盒

膠孢15-羥基二十四烯（15-HETE）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)試劑盒

宛氏擬青霉前列腺H2（PGH2）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒

釀酒酵母前列腺E2（PGE2）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介3(IL-3)試劑盒

枯草芽胞桿菌6-KETO-PGF1a高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白介5(IL-5)試劑盒

釀酒酵母前列腺F2a（PGF2a）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠苗條受體(LR/Ob-R)試劑盒

串珠鐮孢*8-ISO-PGF2a大鼠瘦(LEP)試劑盒

大腸埃希氏菌前列腺D2（PGD2）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠白血病抑制因子(LIF)試劑盒

釀酒酵母PGE1大鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)試劑盒

霍氏瓶霉PGF1a大鼠單核趨化1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒

釀酒酵母PGB2大鼠單核趨化2(MCP-2/CCL8)試劑盒

漢遜德巴利酵母血栓B2（TXB2）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒大鼠單核趨化3(MCP-3/CCL7)試劑盒
羧酸酯酶(CarE)試劑盒規(guī)格髓過(guò)氧化物檢測(cè)試劑盒溶菌抗體

草乙檢測(cè)試劑盒蚓激抗體

溶菌檢測(cè)試劑盒瘦抗體

NAD-蘋(píng)果檢測(cè)試劑盒瘦受體抗體

賴氨氧化2檢測(cè)試劑盒瘦受體抗體（長(zhǎng)）

賴氨氧化3檢測(cè)試劑盒晚期包膜1抗體

脂肪氧化3檢測(cè)試劑盒富含亮氨樣性核抗體

巨病檢測(cè)試劑盒晚期包膜2B抗體

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?/span>100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。