產(chǎn)品名稱:土壤過(guò)氧化物酶(S-POD)試劑盒說(shuō)明書(shū) 規(guī)格:48樣、96樣、 貨號(hào):GOY-016401 檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法、微板法 產(chǎn)品分類:土壤系列 公司產(chǎn)品僅用于科研貯存溫度:2~8℃。 本試劑盒保質(zhì)期:6個(gè)月 【實(shí)驗(yàn)前溶液配制】 配液1、將2X濃縮復(fù)溶液用去離子水按照1:1稀釋(1 份濃縮復(fù) 溶液+1份去離子水)用于樣本的復(fù)溶。 配液2、將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19 稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按 所需用量 配制洗滌液。 配液3、將30X濃縮樣品提取液用去離子水按照1:29稀釋(1份 濃縮洗滌液+29份去離子水),或按所需用量配制洗滌液。 【所用儀器、試劑】 儀 器:微孔板酶標(biāo)儀450nm/630nm、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b 置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:單道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 試 劑:乙腈、中性氧化鋁
測(cè)定步驟: 1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。 2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。 3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制) 4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。 5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑) 選擇抗凝的注意點(diǎn): ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致; ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固; ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿); ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。 LY-96/MD-2/ESOP-1/FITC 熒光標(biāo)記MD-2抗體IgG蝰蛇(Viperin)ELISA試劑盒 Lysozyme/FITC 熒光標(biāo)記溶菌抗體IgG喹啉核糖基轉(zhuǎn)移(QPRT)ELISA試劑盒 Phospho-Lyn (Tyr507) /FITC 熒光標(biāo)記膜相關(guān)酪氨激Lyn抗體IgG快肌肌鈣C(TNNC2)ELISA試劑盒 Phospho-Lyn (Tyr396) /FITC 熒光標(biāo)記化膜相關(guān)酪氨激Lyn抗體IgG跨膜絲氨6(TMPRSS6)ELISA試劑盒 Phospho-Lyn (Tyr497) /FITC 熒光標(biāo)記化膜相關(guān)酪氨激Lyn抗體IgG跨膜絲氨4(TMPRSS4)ELISA試劑盒 LYVE-1/FITC 熒光標(biāo)記淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)受體抗體跨膜絲氨2(TMPRSS2)ELISA試劑盒 M2-PK /FITC 熒光標(biāo)記激-M2抗體IgG跨膜5(TMEM5)ELISA試劑盒 M2-PK /FITC 熒光標(biāo)記激-M2(小鼠來(lái)源抗體)IgG跨膜2樣(TMEM2L)ELISA試劑盒 Phospho-PKM2 (Tyr105) /FITC 熒光標(biāo)記化激M2抗體IgG跨膜27(TMEM27)ELISA試劑盒 Mad1/FITC 熒光標(biāo)記Mad1抗體IgG跨膜2(TMEM2)ELISA試劑盒 MAdCAM-1/FITC 熒光標(biāo)記粘膜血管定居因子抗體IgG跨膜1(TMEM1)ELISA試劑盒 MAdCAM-1/Biotin 生物標(biāo)記粘膜血管定居因子抗體IgG跨膜4域亞家族A成員1(MS4A1)ELISA試劑盒 Mafa/FITC 熒光標(biāo)記v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體()IgG扣帶(CGN)ELISA試劑盒 MAFbx/Fbx32/Atrogin-1/FITC 熒光標(biāo)記泛連接抗體IgG克拉拉16(CC16)ELISA試劑盒 MAG-a/L-MAG /FITC 熒光標(biāo)記髓鞘相關(guān)糖-a抗體IgG可溶性半乳糖凝集3結(jié)合(LGALS3BP)ELISA試劑盒組織PKA激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次三 細(xì)胞Src激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次仲辛 組織Src激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次安息香 細(xì)胞PKC激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次酞 組織PKC激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次正壬 細(xì)胞AMPK激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次脫水 組織AMPK激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次香附 細(xì)胞B-RAF激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次厚樸 組織B-RAF激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次隔山消 細(xì)胞C-TAK激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次大果木姜子 組織C-TAK激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次艾葉 細(xì)胞CaM KII激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次盾葉薯蕷 組織CaM KII激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次巴龍霉 細(xì)胞CaM KIV激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次尿嘧 組織CaM KIV激活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次雙 土壤過(guò)氧化物酶(S-POD)試劑盒說(shuō)明書(shū)抗5b檢測(cè)試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域94抗體 甲狀旁腺激134檢測(cè)試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域82抗體 氨基端前心鈉肽檢測(cè)試劑盒CDK5激活結(jié)合2抗體 含卷曲螺旋域49檢測(cè)試劑盒CDK2相互作用抗體 脫氫檢測(cè)試劑盒周期依賴性激14抗體 硫吲哚酚檢測(cè)試劑盒癌胚抗原相關(guān)粘附分子19抗體 同型半胱檢測(cè)試劑盒先天性紅生成異常性貧血1抗體 3-羧基-4-甲基-5-基-2呋喃檢測(cè)試劑盒癌胚抗原相關(guān)粘附分子16抗體 操作步驟: 實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。
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