實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | 庫(kù)蠓通用PCR檢測(cè)試劑盒 | 英文名稱 | Culicoides spp.PCR | 貨號(hào) | HE30871-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。 8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 特點(diǎn)優(yōu)勢(shì): 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 蛋白酶(枯草桿菌)/枯草桿菌蛋白酶/枯草溶菌素/蛋白酶A.S1398/蛋白酶2709/解朊酶/舒替蘭酶/Proteinase(Bacillus subtilis) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 乳酸脫氫酶(兔?。? L-乳酸脫氫酶/乳酸去氫酵素/LDH/LAD/Lactic dehydrogenase(rabbit muscle) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 膠原酶/骨膠原酶/膠原蛋白解酶/Collagenase 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 透明質(zhì)酸酶/玻璃酸酶/玻璃糖醛酸酶/玻糖酸酶/粘朊酶/粘蛋白酶/透明糖酶/Hyaluronidase 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 過氧化物酶(辣根)/辣根過氧化物酶/過氧化酶/Perxidase(horseradish)/HRP/POD 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g α-半乳糖苷酶/α-D-半乳糖苷半乳糖解酶/蜜二糖酶/α-Galactosidase preparation from green coffee beans 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g β-半乳糖苷酶/乳糖酶/β-D-半乳糖苷酶/乳糖分解酵素/乳酸酶/GAL/β-Galactosidase from Escherichia coli 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 谷氨酸脫氫酶/L-谷氨酸去氫酶/L-GLDH 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 核糖核酸酶(牛胰)/RNA酶/核糖核酸酶A(牛胰)/核糖核酸酶I /RNASE A/ RNase I/RNASE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g 核糖核酸酶H/Ribonulease H 質(zhì)量規(guī)格:GC≥98%,進(jìn)口分裝 包裝;5g 核糖核酸酶T1/Rnase T1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g RNase&DNase清除劑/Rnase&Dnase away 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 去核酸酶試劑/Nuclease eliminator/Nuclease eliminator Wipes 質(zhì)量規(guī)格:>98%,PIKfyve抑制劑 包裝;1g 脫氧核糖核酸酶Ⅰ(牛胰)/去氧細(xì)胞核酸酶/氧核糖核酸-5ˊ-寡核苷酸解酶/無核糖核酸酶/脫氧核糖核酸去聚合酶/脫羥核糖核酸酶(牛胰)/除氧細(xì)胞核酸酶(牛胰) /DNA酶/Dnase Ⅰ 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 脫氧核糖核酸酶Ⅱ(豬脾)/去氧細(xì)胞核酸酶/氧核糖核酸-5ˊ-寡核苷酸解酶/無核糖核酸酶/脫氧核糖核酸去聚合酶/脫羥核糖核酸酶(豬胰)/除氧細(xì)胞核酸酶(豬胰) /DNase II 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;25g 肌酸激酶(兔?。?磷酸肌酸激酶(兔?。?肌酸磷酸激酶(兔?。?CPK/Creatine phosphokinase(rabbit muscle) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g 心肌黃酶/黃遞酶/硫辛酰胺脫氫酶/二氫硫辛酰胺脫氫酶/二氫硫辛酸脫氫酶/Diaphorase 質(zhì)量規(guī)格:>98%,美國(guó)進(jìn)口 包裝;1g 庫(kù)蠓通用PCR檢測(cè)試劑盒Lentinus│giganteus 中文名稱:大革耳(巨大香菇)種屬:Lentinus│giganteus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:97% Termitomyces│albuminosus 中文名稱:雞樅菌種屬:Termitomyces│albuminosus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:95% Calvatia│booniana 中文名稱:西部大禿馬勃種屬:Calvatia│booniana提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:95% Thelephora│ganbajun 中文名稱:干巴菌種屬:Thelephora│ganbajun提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法 純度:99% Panus│brunneipes 中文名稱:纖毛革耳種屬:Panus│brunneipes提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:99% Hypholoma│fasciculare 中文名稱:簇生沿絲菌種屬:Hypholoma│fasciculare提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:99% Trametes hirsuta 中文名稱:毛栓菌(斜面)種屬:Trametes hirsuta提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:97% Lyophyllum│fumosum 中文名稱:煙色離褶傘種屬:Lyophyllum│fumosum提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:97% |