產(chǎn)品名稱:巴氏阿米巴原蟲PCR檢測試劑盒說明書 英文名稱:Balamuthia mandrillarisPCR 編號:HE30681-R 類別:PCR檢測試劑盒 儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。 產(chǎn)品僅用于科研注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 ? 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點: 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 包裝;200mg DnaJ同源亞科B成員1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 包裝;1g Dickkopf 3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;250mg Dickkopf 1試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g Dicer-1 elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;50MG DAB2互作蛋白試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;1g C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;250mg C肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;5g C多肽試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:商品級 包裝;1g CXC趨化因子受體7試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 包裝;5g CXC趨化因子受體4試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;1g CXC趨化因子受體3試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;5g CXC趨化因子配體16試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,BR 包裝;50mg c-sis elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;10g Corin elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,BR 包裝;50g COP9 結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:純度(銅):52.5~56.5% 包裝;25g COLL2-1NO2 elisa試劑盒 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;1g 巴氏阿米巴原蟲PCR檢測試劑盒說明書Aspergillus│flavus 中文名稱:黃曲霉種屬:Aspergillus│flavus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:用于黃麻發(fā)酵,使麻軟化。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0085生長條件:28-30℃存儲條件:定期移植法;其他 純度:98% Aspergillus│terreus 中文名稱:土曲霉種屬:Aspergillus│terreus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:衣康酸。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0085生長條件:28-30℃存儲條件:定期移植法;其他 純度:98% Penicillium citrnum Thom 中文名稱:桔青霉種屬:Penicillium citrnum Thom提供形式:凍干管,斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)磷酸二脂酸培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:Czapek's 瓊脂:蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 6.0-6.5傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件:25-26℃,好氧存儲條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個月。 純度:98% Mucor│mucedo 中文名稱:大毛霉種屬:Mucor│mucedo提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:豆腐乳。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長條件:28-32℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:97% Mucor│wutungkiao 中文名稱:五通橋毛霉種屬:Mucor│wutungkiao提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:腐乳。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0077生長條件:15-25℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:≥99% Aspergillus│candidus 中文名稱:亮白曲霉種屬:Aspergillus│candidus分離基物:酶曲提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:糖化淀粉用。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0085生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98% Trichoderma│koningii 中文名稱:康寧木霉種屬:Trichoderma│koningii分離基物:腐木提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:以蔗渣、秸稈、農(nóng)副產(chǎn)品、工廠纖維素廢渣為底物纖維素霉曲(即纖曲),酶解粗飼料。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長條件:28-30℃存儲條件:定期移植法;其他 純度:97% RhizopuschinensisSaito 中文名稱:中華根霉種屬:RhizopuschinensisSaito提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)果膠酶。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25-28℃,好氧 純度:97% |