實驗外包: 1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析 2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選 7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR 8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | 古柏線蟲通用PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Cooperia spp.PCR | 貨號 | HE30847-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。 二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。 1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。 5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。 6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。 8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。 PCR實驗方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 特點優(yōu)勢: 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。 4. 實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。 5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。 L-色氨酸/L-胰化蛋白氨基酸/L-色氨基酸/L-2-氨基-3-吲哚基-1-丙酸/L-氨基吲哚丙酸/(+/-)-2-氨基-3-(3-吲哚基)丙酸/L-Tryptophan 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25ml D-色氨酸/D-胰化蛋白氨基酸/D-2-氨基-3-吲哚基-1-丙酸/D-氨基吲哚丙酸/D-β-3-吲哚丙氨酸/D-Trytophan 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25g DL-色氨酸/DL-胰化蛋白氨基酸/DL-色氨基酸/DL-2-氨基-3-吲哚基-1-丙酸/DL-氨基吲哚丙酸/ DL-β-(3-吲哚基)-α-氨基丙酸/(+/-)-2-氨基-3-(3-吲哚基)丙酸/DL-Trytophan 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5g BOC-L-色氨酸/N-叔丁氧羰基-L-色氨酸/BOC-L-Tryptophan 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;1g 5-羥基-DL-色氨酸/5-羥基胰化蛋白氨基酸/DL-2-氨基-3-(5-羥基吲哚)丙酸/DL-5-羥基胰化蛋白氨基酸/5-羥基色氨酸/DL-5-羥基色氨酸/DL-5-HTP 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g L-酪氨酸/L-β-對羥基苯基丙氨酸/L-苯酚氨基丙酸/L-β-對羥苯基-α-氨基丙酸/L-干酪氨基酸/(2S,3R)-2-氨基-3-對羥苯基丙酸/L-β-對羥基苯基丙氨酸/L-Tyrosine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 包裝;1g D-酪氨酸/D-β-對羥基苯基丙氨酸/D-苯酚氨基丙酸/D-β-對羥苯基-α-氨基丙酸/D-干酪氨基酸/3-(4-羥基苯基)-D-丙氨酸/D-α-氨基對羥基氫化肉桂酸/D-β-對羥基苯丙氨酸/酥氨酸/D-酪胺酸/D-Tyrosine 質(zhì)量規(guī)格:進分sigmaD1501 包裝;25g DL-酪氨酸/DL-β-對羥基苯基丙氨酸/DL-苯酚氨基丙酸/DL-β-對羥苯基-α-氨基丙酸/DL-干酪氨基酸/3-(4-羥基苯基)-DL-丙氨酸/DL-Tyrosine 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR 包裝;5g 3,5-二溴-L-酪氨酸/二溴酪氨酸/L-3,5-二溴酪氨酸/3,5-Dibromo-L-Tyrosine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,Sigma 包裝;1g 3,5-二-L-酪氨酸/3,5-二酪氨酸/β-(3,5-二-4-羥苯基)α-氨基丙酸/3,5-Diiodo-L-tyrosine dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;100mg L-酪氨酸二鈉鹽/L-Tyrosine disodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>99,ALFA原裝 包裝;500mg L-纈氨酸/L-α-氨基異戊酸/L-2-氨基-3-甲基丁酸/L-2-氨基異舞戊酸/L-穿心排草氨基酸/2-胺-3-甲基丁酸/L-Valine 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR 包裝;100ml D-纈氨酸/D-2-氨基-3-甲基戊酸/D-2-氨基-3-甲基丁酸/D-異戊氨酸/D-α-氨基異戊酸/D-穿心排草氨基酸/D-Valine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;500ml DL-纈氨酸/DL-α-氨基異戊酸/DL-2-氨基-3-甲基丁酸/DL-氨基異戊酸/DL-2-氨基異戊酸/DL-氨基異纈草酸/DL-穿心排草氨基酸/DL-異戊氨酸/DL-Valine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,可用于細胞培養(yǎng) 包裝;100g FMOC-L-纈氨酸/芴甲氧羰基-L-纈氨酸/N-芴甲氧羰基-L-纈氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-L-纈氨酸/Fmoc-L-valine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;25g CBZ-D-纈氨酸/芐氧羰基-D-纈氨酸/CBZ-D-Valine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 包裝;500g L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽/H-Val-OMe•HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng) 包裝;5g 古柏線蟲通用PCR檢測試劑盒Bacillus│mojavensis 中文名稱:摩加夫芽孢桿菌種屬:Bacillus│mojavensis分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:D,98% Burkholderia│sp. 中文名稱:伯克霍爾德氏菌種屬:Burkholderia│sp.提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:>95.0%(GC) Arthrobacter│citreus 中文名稱:檸檬節(jié)桿菌種屬:Arthrobacter│citreus分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:>95.0%(GC) Clavibacter│michiganensis 中文名稱:密執(zhí)安棍狀桿菌種屬:Clavibacter│michiganensis分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:93% Pseudomonas│trivialis 中文名稱:平凡假單胞菌種屬:Pseudomonas│trivialis分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:93% Arthrobacter│aurescens 中文名稱:金黃節(jié)桿菌種屬:Arthrobacter│aurescens分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98% Arthrobacter│nitroguajacolicus 中文名稱:硝基癒瘡木膠節(jié)桿菌種屬:Arthrobacter│nitroguajacolicus分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98% Bacillus│vallismortis 中文名稱:死谷芽孢桿菌種屬:Bacillus│vallismortis分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98% |