熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
鹽酸胺酮C16H14O42-氟-甲氧基苯甲酸

鹽酸胺酮（標準品）C19H22O21,2-二甲基吲哚

阿莫曲普坦蘋果酸鹽C19H20O2羥酸

阿糖腺苷C41H64O132-溴-甲氧基苯胺

阿糖腺苷(標準品)C20H22O6氯-5-酚

氨芐西林/氨芐青霉素C17H17NO32-氯肉桂酰氯

氨芐西林/氨芐青霉素(標準品)C26H34O62,5-二肼鹽酸鹽

(S)-1-氨基-甲基丁基酸蒎烷二酯三氟醋酸鹽C26H36O6溴乙基二苯乙

阿替美唑鹽酸鹽C30H48O5(三氟甲氧基)苯甲酰氯

阿替美唑鹽酸鹽(標準品)C41H47NO194,6-二甲基-2-巰基嘧啶

硫酸阿托品/硫酸DL-莨菪堿C8H8O32,二氯-基吡啶

硫酸阿托品(標準品)C6H8O73,二氯苯甲酰甲酸乙酯

馬來酸阿扎他啶C41H64O13(溴苯基)吡啶

鹽酸班布特羅(標準品)C39H62O122,二氯-乙基-6-酚

鹽酸班布特羅C46H72O17環(huán)磺酰氯

鹽酸乙胺丁C41H66O11(2-甲基喹啉-1-基)烷-1-磺酸內(nèi)鹽

鹽酸乙胺丁（標準品）C20H30O5氯-2-肼基砒啶

鹽酸芐絲肼C21H36O102-氨基-5-溴-2'-氟二苯甲酮
自養(yǎng)無枝酸菌探針法熒光PCR檢測試劑盒膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒Cathepsin D  組織蛋白酶D抗體100 ul

膠原吡啶交聯(lián)(PYD)ELISA試劑盒Cathepsin L  組織蛋白酶L抗體100 ul

降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒CTSG/CG  組織蛋白酶G抗體100 ul

降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒Cathepsin K  組織蛋白酶K抗體100 ul

降鈣素(CT)ELISA試劑盒Cathepsin H  組織蛋白酶H抗體100 ul

堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒CBL2  原癌蛋白CBL2抗體100 ul

堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒phospho-CBL2(Tyr731)  磷酸化原癌蛋白CBL2抗體20 ul

甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒phospho-CBL2(Tyr774)  磷酸化原癌蛋白CBL2抗體100 ul

甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒RUNX2 (Runt-related Transcription Factor 2)CBFA1/  成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。