產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 產(chǎn)品名稱:高致病性禽流感H7亞型病毒核酸試劑盒 規(guī)格:48T/盒 編號(hào):HE32199-R 類別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 水中靛藍(lán)溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 5ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒PCR試劑盒 烯草酮溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 酰菌胺溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 精甲霜靈溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Adenovirus禽腺病毒PCR試劑盒 嘧菌環(huán)胺溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Adenovirus禽腺病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 增效醚溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Adenovirus禽腺病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 氯吡脲溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒RT-PCR試劑盒 啶酰菌胺溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 戊菌唑溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽腦脊髓炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 噻蟲啉溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽戊型肝炎病毒RT-PCR試劑盒 喹螨醚溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽戊型肝炎病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 氧威溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽戊型肝炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 唑螨酯溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽皰疹病毒1型PCR試劑盒 虱螨脲溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽皰疹病毒1型染料法熒光定量PCR試劑盒 噻蟲胺溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品 1ml Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽皰疹病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒 維生素B5/D-泛酸鈣/本多生酸鈣/(R)-N-(2,4-二羥基-3,3-二甲基-1-氧代丁基)-β-丙氨酸鈣/N-(2,4-二羥基-3,3-二甲基丁酰)-β-氨基丙酸鈣/右旋泛酸鈣/VB5BR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,137-08-6RT,避光 100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 1公斤,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 中文名稱: 維生素B5 其他名稱: D-泛酸鈣;本多生酸鈣;(R)-N-(2,4-二羥基-3,3-二甲基-1-氧代丁基)-β-丙氨酸鈣;N-(2,4-二羥基-3,3-二甲基丁酰)-β-氨基丙酸鈣;右旋泛酸鈣 英文名稱: VB5 其他名稱: D-calcium pantothena;Vitamin B5;Pantothenic acid calcium salt;D-(+)-Pantothenic acid calcium 產(chǎn)品規(guī)格: BR,99% 包裝:25克/100克/250克 CAS號(hào):137-08-6 C18H32CaN2O10=476.54 級(jí)別:BR 含量:≥99.0% 比旋光度:+25.5~+27.5° 氮含量:5.7~6.0% 鈣含量:8.2~8.6% 重金屬:≤10 ppm 干燥失重:≤5.0% 性狀:針狀結(jié)晶或粉末。味稍甜而后微苦,有吸濕性,對(duì)光敏感。溶于水、甘油和堿溶液,微溶于乙醇和丙酮,不溶于。5%水溶液pH7.2~8.0,在無二氧化碳的水中為8.7。熔點(diǎn) 195~196℃(分解) 用途:生化研究。配制組織培養(yǎng)基。營養(yǎng)劑 保存:RT,避光 高致病性禽流感H7亞型病毒核酸試劑盒雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA Kit,48T/96T 用途: 教學(xué)科研 人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Plantactinospora mayteni 小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen 大鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Penicillium chrysogenum 兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Bacillus megaterium 雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA Kit,48T/96T用途: 表達(dá)載體 人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Bacillus sp. 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glu)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Enterococcus faecalis 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 |