熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問(wèn)題可以通過(guò)熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩?lái)說(shuō)，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為T(mén)aqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問(wèn)題，反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過(guò)熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類(lèi)基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱(chēng)TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
異標(biāo)準(zhǔn)溶液(1mg/ml,基體：甲)CD8α (2.43) Rat mAb (violetFluor™ 450 Conjuga)2,2'-聯(lián)吡啶-5,5'-二羧酸

硬脂酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(10.0ng/μL,基體：異辛烷)Calretinin (E9R6G) Rabbit mAb化膽

標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)N-Myc (D4F9Z) Rabbit mAb (PE Conjuga)1,二基烷三酮

對(duì)硝基乙標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)PTPRF/LAR Antibody1-代丁炔(含穩(wěn)定劑銅屑)

十二烷基磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL，溶劑：水)IGF-I Receptor α (D3A2W) Rabbit mAbN-(甲氧基-2-羥基亞甲基)-正丁基

1,2,3,四氯(標(biāo)準(zhǔn)品)Granzyme B (D2H2F) Rabbit mAbN-乙?；?3,5-二-L-酪氨酸乙酯

1,2,3,5-四氯標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.104mg/ml,基體:異辛烷)Pro-Survival Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II丫

1,2,5-三氯標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.099mg/ml,基體: 異辛烷)MSR1 (D8K4E) Rabbit mAbN-磺酰

間二甲標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:二硫化碳)CD151 Antibody巰基酸-2-乙己酯

對(duì)特辛基酚(POP)(標(biāo)準(zhǔn)品)CYP17A1 Antibody2-(N-ACETYLHYDRAZINO)-5-BROMOPYRIDINE

磺甲二唑(標(biāo)準(zhǔn)品)One-Carbon Metabolism Antibody Sampler Kit溴-2-氟

二砜(標(biāo)準(zhǔn)品)CDK8 (D6M3J) Rabbit mAb3'-METHYL-BIPHENYL-CARBOXYLIC ACID

2,二氯-1,萘醌(標(biāo)準(zhǔn)品)Nectin-4/PVRL4 Antibody2-乙基噻吩

鄰二甲酸二酯(標(biāo)準(zhǔn)品)CMTM4 Antibody5-甲基胞苷

鄰二甲酸二異辛酯(標(biāo)準(zhǔn)品)SimpleChIP® Mouse USP31 Promor Primers香草縮酮

(標(biāo)準(zhǔn)品)ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb (Mouse Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjuga)氯-2-甲

標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5～3%,酮)ASC/TMS1 (D2W8U) Rabbit mAb (Mouse Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2,4,6-三氟異酸酯

二標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=6～4%,酮)Vemurafenib4,二氧-1,噻惡烷
犬腺病毒探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒百日咳病毒抗體(IgA)ELISA試劑盒Insulin Receptor Beta  胰島素受體β抗體20 ul

白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒Phospho-Insulin Receptor Beta（Tyr1345）  酸化胰島素受體β抗體100 ul

白細(xì)胞酯酶(LE)ELISA試劑盒Phospho-Insulin Receptor Beta （Tyr1361）  酸化胰島素受體β抗體20 ul

白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒Insulin  胰島素蛋白抗體100 ul

白細(xì)胞抗原DR(HLA-DR)ELISA試劑盒Ingrin alpha 3/CD49c  整合素α3抗體100 ul

白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒Ingrin Alpha 3 + Beta 1  整合素α3β1抗體100 ul

白細(xì)胞調(diào)節(jié)素(LR)ELISA試劑盒Ingrin beta 5  整合素β5抗體100 ul

白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒Ingrin alpha 1/CD49a  整合素α1抗體100 ul

白三E4(L4)ELISA試劑盒Ingrin beta 7  整合素β7抗體100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。