特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途! 產(chǎn)品名稱 | *線蟲通用探針法熒光PCR檢測試劑盒 | 英文名稱 | Nematodirus spp. | 貨號 | YSP97002 |
熒光染料的優(yōu)點: 產(chǎn)品僅用于科研使用簡便; 可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合; 價格便宜; 熒光染料的缺點: 不能區(qū)分不同的雙鏈DNA 引物二聚體會影響檢測的敏感性 非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性 引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。 ? 熒光探針: Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。 正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。 當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。 TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。 TaqMan探針技術的優(yōu)點: 熒光背景低; 敏感性高; 雜交穩(wěn)定性高; 熒光光譜分辨率好; 特異性高。 TaqMan探針技術的缺點: 成本高; 設計難度大; 只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。 由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。 PCR技術的定量原理: 擴增曲線 在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。 在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。 PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。 ? 熒光定量PCR原理: 產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。 一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。 DUX3 英文名稱: DUX3蛋白抗體 0.2ml P53凋亡刺激蛋白2抗體 Anti-ASPP2 0.1ml Anti-VWF/PE 熒光素PE標記血管性血友病因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml Rhesus antibody Rh phospho-EIF4EBP1(Ser100) 酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml EGFL7(EGF-like domain containing protein 7) 類表皮生長因子域7抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg 人中期因子(MK)ELISA試劑盒英文名稱:Human Midkine,MK ELISA Kit進口/分裝 人中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒英文名稱:Human neutrophil elastase,NE ELISA Kit* C17orf75 英文名稱: 17號染色體開放閱讀框75抗體 0.2ml Anti-RANK 核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml (MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶7Multi-class antibodies規(guī)格: 48T Anti-OPG 骨保護蛋白/護骨素抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml Rhesus antibody Rh ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 規(guī)格 0.1ml LMA(Human anti-liver cell membrane antibody) ELISA Kit 人抗肝細胞膜抗體 96T PIWIL3 英文名稱: piwi樣3蛋白抗體 0.1ml P44/42 MAPK (細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2) 單克隆抗體P44/42 MAPK (ERK1/2) Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul CaMKIIβ/γ/δ (Phospho Thr287) 單克隆抗體CaMKIIβ/γ/δ (Phospho Thr287) Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul P44/42 MAPK (細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2) 單克隆抗體P44/42 MAPK (ERK1/2) Monoclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul α-微管蛋白 (Acetyl Lys40) 單克隆抗體(4A8)α-tubulin (Acetyl Lys40) MonoKit 人γ干擾素誘導單核細胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA試劑盒英文名稱:Human monocyte ELISA Kit 大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒 進口/原裝 英文名稱: Rat Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA Kit 人纖維蛋白(Fibrin)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Fibrin ELISA Kit進口/原裝 人纖維介素蛋白(fgl2)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit* 人纖維連接素相關抗原(FRA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human fibronection related antigen,FRA ELISA Kit* 人纖維母細胞表面抗原(FSP)ELISA試劑盒英文名稱:Human Fibroblast surface protein,FSP ELISA Kit進口/原裝 人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit* 人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒 英文名稱:Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit進口/分裝 巰基磁珠 Magnetic beads,Sulfydryl4℃密閉、豎直保存2mL 秋水仙素溶液Colchicine Solution常溫保存1mL 秋水仙素Colchicine室溫避光保存100mg 瓊脂糖凝膠 4BSepharose 4B4-8℃保存100mL 瓊脂糖凝膠 2BSepharose 2B4-8℃保存100mL 瓊脂糖?body700/30ul#1540/100ul#2520/200ul *線蟲通用探針法熒光PCR檢測試劑盒癌胚抗原相關細胞粘附分子19抗體Tyk2/Non receptor tyrosine proin kinase 2/FITC 熒光素標記非受體酪氨酸蛋白激酶2抗體IgG100 ul 先天性紅細胞生成異常性貧血蛋白1抗體Tyrosinase/FITC 熒光素標記酪氨酸酶抗體IgG20 ul 癌胚抗原相關細胞粘附分子16抗體T Beta10/FITC 熒光素標記胸腺素β10抗體IgG100 ul 癌胚抗原相關細胞粘附分子21抗體Ubiquitin/FITC 熒光素標記泛素蛋白抗體IgG20 ul 貓眼綜合征染色體候選基因5抗體UCN/FITC 熒光素標記新型血管活性因子UCN抗體()IgG100 ul CUE結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體UCN/FITC 熒光素標記新型血管活性因子UCN抗體(、)IgG1 Pack 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白52抗體Urocortin 3/FITC 熒光素標記尿皮質(zhì)素UCN3抗體IgG100 ul 補體片段C3c抗體UCP-1/FITC 熒光素標記線粒體脫偶連蛋白1抗體IgG100 ul 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白68抗體(皮膚T淋巴細胞淋巴瘤相關抗原)UCP-2/FITC 熒光素標記線粒體脫偶連蛋白2抗體IgG20 ul |