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流感嗜血桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2024-08-28
點擊次數(shù):
864
產(chǎn)品特點:
流感嗜血桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次流感嗜血桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

流感嗜血桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Haemophilus influenzae

貨號

 YSP96775

熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
?
熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結合到模板上,探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題,反應結束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點:
成本高;
設計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
奧沙普秦(標準品)鄰甲酸

尼可占替諾(煙酸占替諾)標準品鄰氨基甲酸

表戈米辛O(標準品)2'-羥基酮

卡巴膽(標準品)磺酰異酸酯

琥珀酸鈉(標準品)環(huán)丁酮

回拉西坦;茴拉西坦(標準品)2,二

卡絡磺鈉(標準品)1-甲基-5-氨基吡唑

卡絡磺鈉2-溴甲基四

泛酸鈣,維生素B52-?;秽?/span>

鹽酸特拉唑(標準品)2,二肼

(標準品)氨基硫酚

氨力農(nóng)(標準品)4,6-二嘧啶

更昔洛韋(標準品)甲基-

腎上腺色腙(卡洛)標準品4,6-二羥基嘧啶

吡拉西坦(標準品)水楊酸甲酯

夫拉扎勃(標準品)對氟

間二酚(標準品)二甲酮

水楊(標準品)1,2,3,四氫萘
流感嗜血桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒ATP結合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體Defensin Beta1/FITC  熒光素標記防御素β1抗體IgG100 ul

糖還原酶抗體Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) /FITC  熒光素標記防御素β2抗體IgG100 ul

血清白蛋白抗體Defensin Beta1/FITC  熒光素標記防御素β1抗體IgG100 ul

抗體(采用活疫苗制備)Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat) /FITC  熒光素標記 防御素β2抗體()IgG100 ul

活化轉錄因子4抗體Defensin alpha1,2,3/FITC  熒光素標記抗防御素α1,α2,α3抗體IgG100 ul

腺苷酸激酶-1抗體Defensin alpha 4 /FITC  熒光素標記防御素α4抗體IgG100 ul

纖維狀肌動蛋白抗體DEK oncogene /FITC  熒光素標記DEK癌基因結合蛋白IgG100 ul

聚集蛋白抗體Delx-1/FITC  熒光素標記Delx-1抗體IgG100 ul

調亡誘導因子抗體Desmin/FITC  熒光素標記結蛋白抗體IgG100 ul

產(chǎn)品相關關鍵字: 流感嗜血桿菌 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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