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牛型放線菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2024-08-29
點(diǎn)擊次數(shù):
824
產(chǎn)品特點(diǎn):
牛型放線菌探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次牛型放線菌探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

牛型放線菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Actinomyces bovis

貨號

 YSP96338

熒光染料的優(yōu)點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價(jià)格便宜;
熒光染料的缺點(diǎn):
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
?
熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí),引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí),Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn):
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn):
成本高;
設(shè)計(jì)難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中,對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
甲氨蝶呤C28H36O15己烯雌酚

甲氨蝶呤(標(biāo)準(zhǔn)品)C42H72O13N-甲基-N-甲酰胺

尼美舒利C19H18O82-氯二苯并[b,f][1,4]氧氮雜卓-11(10H)-酮

硝酸咪康唑C18H20O52,雙(三氟甲基)苯胺

硝酸咪康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)C18H16O6對酮

硫酸小諾霉素/硫酸小諾米星/硫酸沙加霉素C16H14O5氨基異煙酸甲酯

小諾霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)C12H8O4丁酸氯甲酯

MUG;甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸C15H10O6基-2-氟吡啶

米諾地爾C27H30O142-甲基嗎啉

米諾地爾(標(biāo)準(zhǔn)品)C20H27氟-2-硝苯

米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶C20H20O42-氟-6-甲氧基苯酸

米諾地爾(硫酸鹽)敏樂啶(標(biāo)準(zhǔn)品)C25H32O13賽拉

C(標(biāo)準(zhǔn)品)C29H36O10黃原膠

霉素CC22H22O11苯氧基-氟苯甲

絲素C(進(jìn)分)C7H14ClNO22-氯-5-氨基苯酚

咪唑司汀C24H38O35-氟-1-茚滿酮

嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯C21H18NO42-氯萘

嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)C21H18O12(R)-2-羥基-苯基酸甲酯
牛型放線菌探針法熒光PCR檢測試劑盒脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491)  磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體100 ul

褪黑素(MT)ELISA試劑盒AMPK alpha 2  腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體100 ul

突觸融合蛋白2(STX2)ELISA試劑盒AMPK beta 1  腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體100 ul

突觸融合蛋白1A(STX1A)ELISA試劑盒phospho-AMPK beta 1(Ser108)  磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體100 ul

透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒phospho-AMPK beta 1(Ser182)  磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體100 ul

透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒Amylin  糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體100 ul

銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒beta-Amyloid 1-42(CT)  β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體100 ul

同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒beta-Amyloid(1-16) (human)  β淀粉樣肽(1-16)抗體()100 ul

鐵調(diào)素(Hepc)ELISA試劑盒beta-Amyloid(1-16)   β淀粉樣肽(1-16)抗體(、)10 ml

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 牛型放線菌 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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